弓形虫病实验诊断方法应用进展幻灯片.pdfVIP

垫 弗 痼 皇 查 鳓 — — 20— 10． 至 i 茎 姆 卷 塑 ! 塑 』 !u删 of Tr opical D—i se a—ses a nd Para ．s it ol qgy_2010 ：Vol 8：盟! ! ·1 19 · doi ：l 0 ．3969 ／j ．i s s n ．1 6 2- 2302 ．20 1 0 ．02．02 1 ·综述 · 弓 形 虫 病 实 验 诊 断 方 法 应 用 进 展 张斗星综述 沈继龙审校 弓形虫病是由刚地 弓形虫引起的人兽共患寄 弓形虫感染机体后．机体产生针对 弓形虫抗原 生原虫病 ．该病原可寄生于除红细胞外的人类和多 的细胞免疫和体液免疫应答 。近磐年来，随着对 弓 种脊椎类动物的有核细胞 内。人类是 弓形虫的中间 形虫病原体研究 的不断深入和克隆抗体技术 的不 宿主 ，感染 弓形虫后，呈机会性致病 。人孕期感染 弓 断发展 ．弓形虫病免疫学 的诊断研 究有了新 的进 形虫后，可能导致胎儿死亡 、流产 、畸形等。新生儿 展，包括针对 弓形虫抗原、抗体、抗体亲和度和细胞 病死率高。免疫力正常的成年人感染弓形虫后，感 免疫的检测，免疫学方法检测体 内弓形虫特异抗体 染者多呈隐性感染。获得性免疫缺陷病人 。弓形虫 是 弓形虫病诊断和流行病学调查常用方法。 感染后可导致脑炎等中枢系统疾病 。如 弓形虫脑炎 1．抗原检测 和全身播撒性感染如 弓形虫肺病、弓形虫眼病、弓 弓形虫感染早期、急性期或活动期，血液和体 形虫虫血症等 。器官移植病人，由于免疫抑制剂的 液中可存在大量的速殖子、包囊、虫体的代谢产物 使用导致机体免疫功能低下，弓形虫感染后可在多 或裂解产物( 弓形虫循环抗原Ci r cul at i ng a nt i gen 个系统和器官迅速增殖 ．导致机体功能衰竭 。由于 CAg) 。血液或体液中的抗原比特异性抗体出现早， 弓形虫对人类健康危害较大，而临床表现无特异 是病原体存在的直接证据 ．检测抗原特异性高。因 性。因此对 弓形虫感染的实验室诊断已成为寄生虫 此检测GAg可作为弓形虫感染的萤要辅助诊断方 学工作者关注 的问题之一。 法。常用的检测方法有酶联免疫吸附试验 一、病原学诊断 ( ELI SA) 、生物素一亲和素ELI SA(ABC- ELI SA) 等。 1．直接涂片或组织切片法 Geor ge等人建立了检测 弓形虫循环抗原MI CI O 病理标本如脑脊液 、痰液 、胸水 、腹水等作涂片 的ELI SA方法，在 弓形虫RH株感染的小鼠模型 或抹片，或实质器官标本如肺、脾 、肝 、淋巴结、胎 中．MI CI O抗原在感染的第2天出现 ．并且逐渐增 盘、脑组织( 死胎) 等作组织切片。吉姆萨染色为临 高 。Ch ent l oI 等人建立 的ELl SA法检测 弓形虫抗原， 床常用的方法。操作方法简便 ，条件要求低 。标本 自 可检测到的最低浓度为31．2ng ／m1．敏感性好。可 以 然干燥后，甲醛同定，即口f 做吉姆萨染色。发现 弓形 用于检测血清、脑脊液和乳液中的 弓形虫抗原。 虫滋养体即可确诊感染。过氧化物酶一抗过氧化酶 At t al l ahI ¨】等人用酶联免疫吸附试验( ELI SA) 检测血 染色法( PAP) 检测速殖子，具有 良好的敏感性和特 清 中的循环抗原。结果发现在急性期人血清 中和 弓 异性 ，在石蜡切片中．能检测到弓形虫 的存在 ，过碘 形虫病原中都可 以检测到大小为36kD’的抗原，其 酸一雪夫染色( PAS) 染色缓殖子，银染法检测包囊 灵敏度