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溶血对生化检验影响
溶血对部分血液生化指标的影响【摘要】? 目的 探讨血清标本溶血对部分血液生化检验结果的影响。方法 采用全自动生化分析仪检测50份健康体检者血液标本在溶血前和溶血后血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、胆固醇(CHO)、血清葡萄糖(GLU)的值,并进行了比较和统计分析。结果 溶血后AST、TBIL、ALT值比溶血前的值高,具有统计学意义;CRE的值比溶血前的低,统计差异显著;GLU、BUN、CHO的值溶血前后未见明显统计学意义的改变。结论 溶血对血清AST、TBIL、ALT、CRE有明显的干扰影响,提示在分析测定结果时注意是否溶血。
【关键词】? 溶血;生化检验
??? 在工作中往往因各种原因导致标本溶血,而血清标本溶血时主要影响哪些指标,测定结果是否真实可靠,是所有检验工作者需要了解的问题。为了能及时客观地分析生化指标的变化是否具有临床意义,应当详细了解标本溶血对各项血液生化指标的影响。本文观察了部分常用生化指标在标本溶血前后检测结果的变化,旨在为标本溶血时血液生化结果分析提供一定的 HYPERLINK / 参考依据,尽量增加生化测定数据的可利用性。
1? 资料与方法
??? 1.1? 仪器与试剂? HITACHI 7070全自动生化分析仪(日本)。谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、胆固醇(CHO)、血糖(GLU)生化分析试剂盒,均购自北京康大泰科医学科技有限公司。
??? 1.2? 溶血的血清标本的制备? 健康体检者50人,禁食不禁水12h,各抽取静脉血4ml,分别注入两支干燥试管各2ml。其中一支让其 HYPERLINK /lixue/ 自然凝固,另一支在血液凝固前用金属棒搅拌使其溶血,然后以3000r/min离心10min,去上清液分别为未溶血和溶血的血清标本。
??? 1.3? 生化指标的测定? 用己糖激酶法测定血清葡萄糖(GLU),连续检测法测定谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),重氮法测定总胆红素(TBIL),尿素酶—GLDH法测定尿素氮(BUN),苦味酸法测定肌酐(CRE),氧化酶法测定胆固醇(CHO),以上指标均用HITACHI 7070全自动生化分析仪测定。
2? 结果
??? 溶血后AST、TBIL、ALT的值比溶血前的值高;CRE的值比溶血前的值低;GLU、BUN、CHO的值在溶血前后未见明显改变,见表1。 表1? 溶血对部分生化指标的影响 注:**P0.01
??? 3? 讨论
??? 3.1? 谷草转氨酶(AST)? 人红细胞中AST活性约为血浆中的40倍[1]。当标本溶血时,势必引起血清中AST活性的升高,从而使溶血标本的结果明显高于未溶血标本。AST主要是作为肝损伤的敏感指标,测定结果的偏高会导致假阳性的产生。故出现溶血标本应当在报告中注明。
3.2? 谷丙转氨酶(ALT)? 细胞内ALT含量比血浆中高约7倍,因此溶血后ALT含量测定的增高主要来源于细胞内ALT的大量释放。可见与AST相比,ALT受溶血影响轻些,故对标本的要求低一些,但在分析结果时要注意考虑溶血的影响。
??? 3.3? 总胆红素(TBIL)? 笔者使用的试剂盒是用重氮法测定总胆红素的,最后生成紫红色的偶氮胆红素,主要在波长为540~560nm处有光吸收。而血红蛋白在波长540~550nm处有光吸收[2],恰与偶氮胆红素的比色波长相近。因此溶血后红细胞破裂时大量血红蛋白进入血清,势必造成总胆红素测定值的升高,是总胆红素的正向干扰因素。此外,由于血红蛋白与重氮试剂反应形成的产物可破坏偶氮胆红素,溶血对重氮法测定胆红素同时存在负向干扰,使测定结果偏低,但该作用较轻微[3],因此溶血后由于血红蛋白对测定结果的干扰,胆红素的测定结果往往偏高。
??? 3.4? 肌酐(CRE)? 笔者使用的试剂盒是采用苦味酸法测定CRE的,而苦味酸特异性较差,易受其他还原性物质影响,主要是维生素C、酮体、丙酮酸等假肌酐干扰[4]。假肌酐物质也可与苦味酸形成颜色反应,导致测定值偏差。这种假肌酐物质红细胞中最多,血清中较少,故溶血后红细胞中假肌酐物质是造成测定值发生偏差的主要原因。
??? 3.5? 溶血原因及防止? 高亚英[5]等认为溶血的原因主要是操作不当和抽血器具不合格造成的。结合我们日常工作分析造成溶血的可能原因主要包括:(1)由于抽血困难,采血时定位进针不准、针尖在血管中探来探去造成血肿等而发生溶血。(2)注射器和针头连接不紧,采血时空气进入,在抽取的血标本中混有泡沫,这种混有泡沫的血标本,放置一定时间后泡沫破裂或迅速干燥,造成血细胞破坏而发生溶血。(3)血标本在运输过程中过度震荡或贮存不当。(4
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