抗核抗体自动化流程的评估.pdf

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抗核抗体自动化流程的评估

抗核抗體自動化流程的評估 特檢組 蔡慧娟 105.4.26 一切的起源都來自於-免疫反應 免疫反應: 個體的防禦機制,辨認外來物質(例如抗原: 病毒、真菌、細菌或是移植的器官) 並產生特異性的抗體來對抗。 參與免疫反應的抗體就是~~免疫球蛋白 敵我不分 = 自體免疫 ANA - IFA  The detection of ANA in human serum is an important tool for diagnosing connective tissue diseases , especially systemic lupus erythematosus (SLE) Anti-nuclear Ab(ANA) 原理:間接性免疫螢光法 (Indirect immunoFluoresence Assay; IFA )  細胞種類 :Human pharyngeal cancer (Hep-2 cell)  用Hep-2 cell的優點:  細胞個別成長並固定於平面上,使細胞間之抗原性 具一致性 細胞核大容易判讀 各種cell stage都會呈現 ANA IFA 稀釋血清(一級抗體)滴在含有HEP-2細胞玻片上(抗原) 反應20min ,wash 2次 滴入山羊抗人體免疫球蛋白結合FITC (二級抗體) 反應20min ,wash 2次 螢光顯微鏡觀察判讀 (400X ) 參考值 : 40x(-) 細胞週期(Cell cycle) ANA Pattern 特徵 均質型 Homogeneous 特徵: 螢光很均勻地染佈整個核 Interphase: 整個核呈現均勻的螢光 Mitotic cell Mitotic phase: 染色體會染上強烈之螢光” 螢光棒棒“ 斑點型 -- speckled pattern 斑點型(speckled) : 在核內可見到顆粒狀的螢光,染 色並不平滑。核仁通常未染上螢 光。 Interphase : 粗顆粒狀螢光、細顆粒狀螢光、 核仁不會染上螢光”鬼臉” Mitotic phase :

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