观察DNA和RNA在细胞中的分布试验分析.docVIP

“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验分析 （必修1　P26） 实验原理 甲基绿和吡罗红对DNA、RNA的亲和力不同：DNA　　　　绿色；RNA　　　　红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。 程序 操作步骤 注意事项及原因 取口腔 上皮细 胞制片 在洁净的载玻片上，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液 载玻片要洁净，防止污迹干扰观察效果；保持细胞原有形态 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，放在载玻片上的液滴中涂抹几下 消毒是为防止感染及其他微生物的影响；漱口避免取材失败 用酒精灯将载玻片烘干 玻片烘干：要在酒精灯火焰上来回移动，防止载玻片受热不均破裂；烘干至细胞吸附即可 水解 将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中，用30℃水浴保温5 min 改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体的DNA与蛋白质分离，利于DNA与染色剂结合 冲洗涂片 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10 s 蒸馏水：洗去残留在外的盐酸 缓水流：防止细胞被水流冲走 染色 将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴于载玻片上，染色5 min 吡罗红甲基绿染色剂的配制需要蒸馏水且要现配现用 观察 先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰。然后换用高倍物镜观察 先用低倍镜找到要观察的区域，再换用高倍镜调节清晰观察 实验现象及相关结论 现象 结论 绿色明显集中且接近细胞中央 DNA主要分布于细胞核中 绿色周围的红色范围较广 RNA广泛分布于细胞质中 几种液体在实验中的作用 ①0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮细胞正常形态。 ②8%盐酸：改变细胞膜等的通透性；使染色体中的DNA与蛋白质分开。 ③蒸馏水：配制染色剂；冲洗载玻片。 [示例] 制作蛙血涂片，将血涂片浸在1 mol·L－1的盐酸水解液中30℃水解10 min，用清水将血涂片冲洗后，再用吡罗红甲基绿染色剂在20℃下染色10 min，镜检观察。 ⑴在显微镜下会看到红细胞中的____________被染成绿色，原因是________________________；____________被染成红色，原因是________________________。 ⑵通过该实验能得出什么结论？____________________________________。 ⑶用人的血液制作血涂片观察红细胞，能看到上述现象吗？为什么？________________________________________________________________________。 [解析] 本题考查对观察核酸分布的实验原理的理解。 ⑴甲基绿可使DNA呈绿色，吡罗红可使RNA呈红色，因此有DNA和RNA分布的结构被吡罗红甲基绿染色后会呈现相应的颜色。 ⑵通过颜色反应可推知DNA主要分布于细胞核，RNA主要存在于细胞质。 ⑶由于人成熟红细胞没有细胞核，也无RNA的合成，所以不能看到相应的颜色反应。 [答案] ⑴细胞核　甲基绿使细胞核中的DNA呈现绿色　细胞质　吡罗红使细胞中的RNA呈现红色 ⑵真核细胞的DNA主要分布在细胞核中，RNA主要分布在细胞质中 ⑶不能。因为人的成熟红细胞中无细胞核 使用高倍显微镜观察几种细胞 （必修1　P7） 显微镜的成像原理 ⑴光源→反光镜→光圈→物体→物镜→镜筒→目镜→眼睛。视野光线的明暗可通过反光镜、光圈来调节，反光镜又分为平面镜和凹面镜两种，当光线不足时可选用凹面镜、较大的光圈，这样反射光线较多，视野较为明亮。 ⑵放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数。 ①物镜越长，放大倍数越大，距装片距离越近；目镜越长，放大倍数越小。 ②显微镜的放大倍数是指物像长度或宽度的放大倍数，而不是面积或体积的放大倍数。 ⑶显微镜的成像特点 ①显微镜下所成的像是倒立的放大的虚像，倒立是指上下、左右均是颠倒的，相当于将观察物水平旋转180度。 ②要移动物像时，物像偏向哪个方向，应向哪个方向移动装片。 1. 显微镜的使用原则 ⑴先降后升：先调节粗准焦螺旋使镜筒下降，两眼要注视物镜与玻片之间的距离，到快接近时（距离约为0.5 cm）停止下降，再缓慢上升镜筒观察寻找目标。 ⑵先低后高：首先用低倍镜观察，找到要放大观察的物像，移到视野中央，然后换上高倍物镜观察。 ⑶先粗后细：在低倍镜下先调节粗准焦螺旋，换上高倍物镜后，不能再转动粗准焦螺旋，而只能用细准焦螺旋来调节。 2. 高倍镜与低倍镜的比较 物像大小 看到细胞数目 视野亮度 物镜与载玻 片的距离 视野范围 高倍镜 大 少 暗 近 小 低倍镜 小 多 亮 远 大 3. 判断污物存在的位置 ⑴污物可能存在的位置：物镜、目镜或装片 ⑵判断方法如下：