20160819 外泌体这周有什么研究新进展？.docVIP

外泌体这周有什么研究新进展？ 原创?2016-08-19?小诺 欢迎关注我们的每周外泌体研究进展盘点，往期回顾可回复“外泌体”进行查看，也可回复献+邮箱”索取文献原文。 那么，这周，外泌体的研究又有了怎样的成果发表出来？我们一起来看看吧。 外泌体本周研究新进展 01牛胎儿血清RNA干扰细胞培养基来源的胞外RNA? Fetal Bovine Serum RNA Interferes with the Cell Culture derived Extracellular RNA? 期刊：Scientific reports? 影响因子：5.228? 作者单位： 哈佛医学院 文献简介 在过去的数十年来，牛胎儿血清(FBS)一直被用于真核细胞培养。但是，很少人注意到FBS的RNA内含物对细胞培养的生物学影响。在这篇文章中，研究者使用RNA测序，证实了FBS含有丰富的蛋白编码作用和调控作用的RNA种类，包括mRNA、miRNA、rRNA和snoRNA。在胞外囊泡(EV)和胞间通讯的研究中，通常都会使用无囊泡的FBS(vesicle-depleted FBS, vdFBS)，避免来自FBS的囊泡对EV产生污染，所以用于细胞培养的FBS，会先经过超速离心，去除其本身的囊泡，才能用于EV研究。而研究者RNA测序获得的FBS RNA图谱的大部分(70%)甚至在超速离心之后仍保留在vdFBS中 ！FBS相关的RNA会和细胞培养基来源的胞外RNA (exRNA)和一起被提取出来，干扰下游RNA分析。 许多进化上保守的FBS来源的RNA种类都会被错误地注释为人类或小鼠的转录本，尤其是在FBS中丰度很高的特异miRNA，如miR-122、miR-451a和miR-1246，已被报道富集于细胞培养基来源的EV，很可能是被FBS造成混淆的结果。公开的exRNA数据库分析也支持FBS污染这个猜测。除此以外，FBS转录本还可以被培养的细胞吸收，影响高敏感性基因表达图谱技术（如二代测序）的结果。因此，在实验设计的注意事项方面，有必要重视FBS来源的RNA造成的干扰和误解，将它带来的影响最小化。 小诺看法 文章中提出的这个问题，还是十分严峻的，所以特地向大家介绍这篇文章。除了很个别的EV研究能完全无血清培养细胞，提取EV，其余大部分还是需要使用血清的。这篇文章的数据已经很清晰了，研究者能在10% FBS培养的小鼠细胞中检测到只有牛、人、猩猩和黑猩猩中表达的miR-1246，让人无法忽略这个问题。? 研究者还提出，基于细胞培养的exRNA研究的影响因素有几个：培养基组分，包括血清，生长因子和其他天然衍生物；FBS/培养基预处理步骤不同，去除RNA的效果也不同，研究者给出了一个较高效的延长版超离方法；最后，即使在相同的实验条件下，FBS和培养基的品牌和批次也会有不一样的混杂因素。这么说来，研究者们可能需要设置不同的control来减少以上因素对实验的影响了，比如采用相同步骤从相对应的新鲜培养基提取的RNA样本。 02 PGE2/EP4信号通路通过胞外囊泡内的脂筏调控乳腺干细胞状态的转变? PGE2/EP4 signaling controls the transfer of the mammary stem cell state by lipid rafts in extracellular vesicles? 期刊：stem cells? 影响因子：5.902? 作者单位：台湾健康研究所 文献简介 前列腺素E2(PGE2)发起的信号通路有助于干细胞内稳态和再生，但是还不清楚它的信号是怎样调控细胞多能性的。这篇文章中，鉴定了一个之前未知的机制：PEG2/前列腺素E受体4 (EP4)信号通路调控着多个信号通路(如PI3K/Akt信号、TGFβ信号、Wnt信号、EGFR信号)，维持基底乳腺干细胞(basal mammary stem cell)表型。 基底乳腺上皮干细胞(MaSC)从间叶细胞/干细胞状态向非基底型MaSC状态的转化，发生在应答EP4拮抗剂的时候。EP4拮抗剂会引起信号通路元件的释放，以脂筏/caveolae依赖的方式控制它们转运到胞外囊泡(EV)/exo中；通过诱导EV/exo释放，EP4拮抗剂间接使需要乳腺上皮干细胞内稳态的通路失活，如典型和非典型的Wnt、TGFβ和PI3K/Akt通路。EP4拮抗剂引起信号受体和信号元件从非脂筏组分转变为脂筏组分，然后释放到EP4拮抗剂诱导的EV/exo，使干细胞状态减少。相反，腔内的乳腺上皮细胞可以获得基底的干细胞特性，然后吸收EP4拮抗剂诱导的干细胞EV/exo，然后形成乳腺。 这项发现，证实了PGE2/EP4信号通过调控EV/exo释放，控制乳腺上皮干细胞的内稳态。通过含