HIV-1 p24抗原ELISA试剂盒说明书.docVIP

人类免疫缺陷病毒1型p24抗原 酶联免疫试剂盒说明书 【产品名称】 通用名：人类免疫缺陷病毒1型p24抗原酶联免疫试剂盒 英文名：ENZYME IMMUNOASSAY FOR DETECTION OF HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPE I P24 ANTIGEN IN HUMAN SERUM, PLASMA AND CELL CULTURE SUPERNATANT 【包装规格】 96人份/盒。 【预期用途】 本试剂盒用于人类免疫缺陷病毒1型p24抗原（Human Immunodeficiency Virus Type 1 p24 Antigen）的定量检测，适用于人血清（或血浆）及细胞培养上清液等标本，仅供研究使用。 【检验原理】 本产品采用固相酶联免疫吸附分析法（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）检测人血清（或血浆）中的游离HIV-1 p24抗原和细胞培养上清液等标本中的HIV-1 p24抗原。本分析方法是基于双抗体夹心的非竞争性免疫分析。校准品和样品中HIV-1 p24抗原与固相抗- p24单克隆抗体和生物素标记的抗-p24多克隆抗体通过免疫反应，形成固相抗-p24单克隆抗体—p24抗原—抗-p24多克隆抗体-生物素复合物；温育后洗涤，洗去非特异或多余的抗原和多余的生物素标记的抗- p24多克隆抗体；然后加入HRP（Horseradish Peroxidase，辣根过氧化物酶）标记的链亲和素，形成固相抗- p24单克隆抗体—p24抗原—抗-p24多克隆抗体-生物素—链亲和素-HRP复合物；温育后洗涤，洗去多余的HRP标记的链亲和素。加入TMB-H2O2底物溶液，HRP催化H2O2氧化TMB生成蓝色的产物（最大吸收峰655nm），加入终止液终止酶催化反应，生成黄色产物（最大吸收峰450nm）。其吸光度与校准品和样品中的HIV-1 p24抗原浓度成正相关。通过剂量－反应曲线可得出样品中HIV-1 p24抗原浓度。 试验类型 温育时间 试验所需时间 试验温度 试验所需样本体积 免疫度量分析 120 分钟 大约150分钟 37°C 和室温（18~30℃） 75μL 反应原理图： Microw Microwell Biotinylated rabbit anti-H Biotinylated rabbit anti-HIV-1 p24 antibodies Mouse anti-HIV-1 p24 antibodies Sample HIV-1 p24 Antigen HRP Conjugated Streptavidin Absorbance Signal Reagent Signal Reagent 【主要组成成份】 抗体包被板 （Antibody Coated Microplate） 1块 包被有鼠抗-HIV-1 p24单克隆抗体的聚苯乙烯微孔板，约200ng/孔。8孔×12条。 铝箔袋密封包装，含干燥剂。标签编号为R1。 HIV-1 p24抗原校准品 （HIV-1 p24 Antigen Calibrator） 1mL×1支 重组HIV-1 p24抗原溶液，200IU/mL（约相当于4,000pg/mL），稀释液为校准品稀释液。用英国国家生物标准与检定所(National Institute for Biological Standards and Control, NIBSC)提供的WHO标准品（HIV-1 p24 Antigen 90/636）校准。 绿色PP盖子和无色PP塑料管。标签编号为R2。 校准品稀释液 （Calibrator Diluent） 20mL×1瓶 磷酸盐缓冲液，含动物血清和钙化的正常人血浆（经ELISA检测，HBsAg、抗-HCV和抗-HIV 1+2均为阴性），pH约7.3。防腐剂为NaN3（不超过0.1%）和EDTA。 绿色PP盖子和无色HPDE塑料瓶。标签编号为R3。 生物素标记抗体 （Biotinylated Antibody） 5mL×1瓶 生物素标记的兔抗-HIV-1 p24多克隆抗体，约4μg/mL。缓冲液为Tris-HCl，含动物血清、稳定剂、表面活性剂和绿色染料，pH约7.4。防腐剂为NaN3（不超过0.1%）。 蓝色PP盖子和无色HPDE塑料瓶。标签编号为R4。 HRP标记链亲和素 （HRP Conjugated Streptavidin） 20mL×1瓶 HRP标记链亲和素，约0.1μg/mL（25mU/mL HRP）。缓冲液为Tris-HCl，含动物血清、稳定剂、表面活性剂和红色染料，pH约7.4。防腐剂为ProClin?300（不超过1%）。 红色PP盖子和棕色HPDE塑料瓶。标签编号为R5