2011、1.1DNA重组技术基本工具.pptVIP

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2017-07-27 发布于河南
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2011、1.1DNA重组技术基本工具.ppt

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2011、1.1DNA重组技术基本工具

专题一　基因工程;基因工程的概念;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;1.1 DNA重组技术的基本工具; 工具1 限制性核酸内切酶 ──“分子手术刀” ; 1.基因工程中的“分子手术刀”是指，目前有四千种,它们全部提取于生物。据酶切特点，可将其分为两类：一类是切割部位无特异性；另一类是只能在特定的核苷酸序列上切割，这种特定的核苷酸序列都是结构。在基因工程中使用最多是后一类酶。后一类限制酶在切割部位进行切割时，有错位切和平切两种。切割时都是切断两个核苷酸之间的 .键,其结果是DNA被截成两段并形成新的末端,新末端有两种即和。 2. EcoRⅠ限制酶能识别序列，并在之间切开。SmaⅠ限制酶能识别。序列，并在之间切开。 3. CCAGAATTCAGAGCCCGGAATTGCC GGTCT TAAGTCTCGGGCCTTAACGG 上述DNA片段在EcoRⅠ限制酶/SmaⅠ限制酶切割后分别是段和段.;;平末端的形成; 工具2 DNA连接酶 ──“分子缝合针”; 1.“分子缝合针” 即，据其来源不同可分为两类，一类是来自大肠杆菌的。连接酶，另一类则是来自的T4 DNA连接酶。两者都是将链DNA片段“缝合”起来，恢复被酶切开的两个核苷酸之间的键。但它们的作用有差别：连接酶只能作用于黏性末端，而连接酶两种末端都起作用。 ;;磷酸二酯键 ; A; AATTCGGCATAC… ; AATTCGGCATAC… ; 工具3 基因进入受体细胞的载体 ── “分子运输车”; 1.在基因工程中使用的载体除来自细菌的。外，还有、等，它们的本质都是。 2.作为运送目的基因的载体，必须具备哪些条件？; 复制原点