小鼠体细胞核移植重构胚中γ-微管蛋白的动态变化 - 生理学报.pdf

158 生理学报Acta Physiologica Sinica , April 25, 2013, 65(2): 158–164 研究论文 γ- 小鼠体细胞核移植重构胚中 微管蛋白的动态变化 1 2,* 张庆华 ，雷蕾 1 157005 2 牡丹江市第二人民医院病理科，牡丹江 ；哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室，胚胎与干细胞工程重点实验室， 哈尔滨 150081 (somatic cell nuclear transfer, SCNT) γ- 摘 要：本文旨在研究小鼠体细胞核移植 重构胚中 微管蛋白的动态变化。采用免疫荧光 化学染色与激光共聚焦显微镜观察的方法，对去核前后第二次减数分裂中期(metaphase II of meiosis, MII) 的卵母细胞和核移 γ- γ- MII γ- 植后的重构胚进行 微管蛋白的定位观察，分析 微管蛋白的作用。结果显示， 期卵母细胞去核后， 微管蛋白主要分 γ- 布于皮层；卵母细胞激活后随着胞质星体的逐渐增多，皮层 微管蛋白明显减少，但没有新的纺锤体形成。卵丘细胞注入去 MII SrCl γ- 核 期卵母细胞后，经 2激活能形成一个纺锤体，在分裂前期，斑点状的 微管蛋白散布在染色体之间；在分裂中期， γ- γ- 微管蛋白沿着纺锤体分布或聚集于纺锤体两极；在分裂后期或末期， 微管蛋白迁移到分开的染色单体之间。部分重构胚 γ- MII 发生提前激活，形成异常纺锤体，主要表现在 微管蛋白和染色体分布异常。卵丘细胞注入未去核的 期卵母细胞后，经 SrCl γ- 2激活后能形成两个纺锤体， 微管蛋白的分布与正常核移植相类似。同样，部分卵母细胞发生提前激活，形成两个小 γ- SCNT 梭形纺锤体或一个宽而大的桶状纺锤体。以上结果提示，供体细胞核内的 微管蛋白在 重构胚纺锤体组装过程中发挥 SCNT γ- 着关键作用； 重构胚易被提前激活形成异常纺锤体， 微管蛋白的异常与染色体分布失常和纺锤体结构异常密切相关。 γ- 关键词： 微管蛋白；核移植；有丝分裂；小鼠 中图分类号：R329.2+4 Dynamic changes of γ-tubulin in mouse somatic cell nuclear transferred em