玉米Na+H+质子泵ZmNHX1功能的初步探究.pdfVIP

摘要 植物的Na-／矿质子泵(NHX)也称Na●／一逆向转运蛋白，通常 位于细胞的质膜或内膜系统上，参与细胞内运输、调节细胞内pH 值以及Na+的区域化，在植物抗盐胁迫中起重要作用。目前拟南芥 NHXs家族研究最清楚，共有8个NHX基因，其余多个植物NHX基 因均有报道，它们分属于2个大亚家族，一类位于质膜上，另一类 位于细胞内膜系统，质膜上NHX基因也称为SOS．Like。位于内膜 系统中的NHXs包括位于液泡膜上的ClassI和位于内质网、高尔基 II。 体等上的Class 本文以拟南芥NHX序列为模板，在maizeGDB及MAGI等数 据库中进行blastp比对，最终获得7个玉米NHX全长序列，重新命 名为Zm删～Z朋M啊7。根据所得序列设计引物，通过RT．PCR扩 增和测序，共获得7个ORF序列，对其蛋白质序列进行分析，发现 I， ZmNHX5和ZmNHX6属于Class 族。本文实验部分主要对ZmNHXI基因及其启动子开展了研究。 对ZmNHXl启动子进行克隆和信息学分析，发现其具有ABA 和干旱诱导元件。用实时定量PCR技术分析玉米幼苗ZmNHXl基因 在非生物胁迫(ABA、NaCl、LiCI、脱水、高温及低温)下的表达 情况，发现NaCl处理后全株及根部锄删的表达量上升，而且 的表达一定程度上受到ABA的抑制。对器官表达特异性分析，发现 加删在成熟玉米植株的根、茎、叶、雄蕊和雌蕊等器官中均有 表达，其中叶、雄蕊和穗中表达量较高。 利用缺失Na+／H+反向转运器的酵母功能缺失突变体ATX3进行 功能互补实验，构建pYES．2．ZmNHXl酵母表达载体并转化酵母， 离子的耐受能力。利用mbSUS酵母双杂系统分析玉米ZmNHXl与 的成员互作，研究工作有待继续。 关键词：ZmNHX、实时定量、ZmCIPK、CBL Ⅱ Abstract PlantSodiumProton named NHX)，also pump(Na+／H+exchanger orinter-cellularmembrane． in membrane Na+／H+antipoter，locateplasma areinvolvedinintracellular pHregulation， 111ey transport，intraceUular the an rolein and response playimportantplant Na+regionalization，and tosaltstress．Thereare NHX inA andother multiplegenesrabidopsis two NHXhavebeenfoundtill to sub— plants，8genes now．Theybelong