灵芝三萜单体化合物对鹅膏毒肽中毒小鼠的治疗作用和其机理研究.pdfVIP

分类号 密级 学校代码 !Q5垒2 学号 灵芝三萜单体化合物对鹅膏毒肽中毒小鼠 的治疗作用及其机理研究 ofAction TreatmentEffectsandMechanisms of MonomerfromGanoderma Triterpenoids on Liver luciduma-Amanitin--Induced Injury inMice 指导教师姓名、职称． 医佳红数援． 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一五年六月 万方数据 摘 要 我国的食物中毒死亡事件主要是由毒蘑菇中毒引起的。作为有效 的解毒剂，灵芝煎剂已在临床上用于治疗鹅膏菌引起的中毒。作为灵 芝的主要药效成分之一，灵芝三萜被证实具有多种药理作用。本文探 讨了5种灵芝三萜单体化合物、灵芝总三萜(GLTT)和对照药物水 飞蓟宾对泓鹅膏毒肽(a-AMA)中毒小鼠的治疗作用及其机理，获得了 以下结果： 1．灵芝总三萜的提取、分离纯化：以灵芝子实体粉末：无水乙醇 =1：20的比例，80‘C水浴浸提4个小时，重复该过程3次，得粗提液， 浓缩后得浸膏，经大孔吸附树脂(AB一8)吸附后梯度洗脱(首先用 水洗，待流出液无色后，70％、90％乙醇梯度洗脱)，收集洗脱液浓 缩后冻干，得粗提物，萃取后，以不同比例(98：2、96：4、94：6、92：8、 90：10)的氯仿、甲醇为洗脱剂过硅胶柱继续分离纯化，收集氯仿： 甲醇=98：2组分，浓缩，冷冻干燥后得到纯度98％左右的灵芝总三 合物，其中含有灵芝酸A、B、G和灵芝烯酸B。 2．灵芝三萜单体化合物及灵芝总三萜的体外抗氧化活性：分别 采用DPPH自由基清除活性的测定、铁离子螯合能力测定、还原力测 定3种方法检测了5种灵芝酸和灵芝总三萜的抗氧化活性，结果表明 各物质均具有较强的抗氧化能力，其中灵芝酸C2的抗氧化能力最强， T 万方数据 灵芝酸A的抗氧化能力最弱。 3．灵芝三萜单体对a．鹅膏毒肽中毒小鼠的治疗作用：与正常组相 比，中毒小鼠血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转 移酶(AST)活性显著升高，引起严重肝损伤。经灵芝三萜单体、灵 芝总三萜和水飞蓟宾治疗后，ALT、AST的活性显著性降低，表明5 种灵芝三萜单体化合物和灵芝总三萜具有水飞蓟一样的治疗效果；不 清川-一T、AST活性，并且具有剂量正相关性，剂量为20 mg／kg／day 时治疗效果最显著；灵芝总三萜、灵芝三萜单体和水飞蓟宾治疗后能 降低致死剂量下中毒小鼠死亡率20—40％。 4．灵芝三萜单体对洳鹅膏毒肽中毒小鼠抗氧化活性的影响：a．鹅 膏毒肽中毒处理后，小鼠肝脏匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)以及过 氧化氢酶(CAT)的活性明显降低，而丙二醛(ⅧA)的含量显著 的升高。灵芝三萜单体、灵芝总三萜和水飞蓟宾治疗后，能显著的增 加中毒小鼠的SOD和CAT酶活性，并显著降低MDA的含量。不同 的SOD和CAT酶活性，并显著降低MDA的含量，并且具有剂量正 相关性，剂量为20 mg／kg／day时效果最显著；这些结果表明灵芝三萜 具有治疗作用的机理之一是其具有抗氧化活性，能清除氧自由基，