狼毒组织培养和其黄酮类成分研究.pdfVIP

摘要 狼毒(Stellera chamaejasme)，又名断肠草(内蒙古)，拔萝卜、 属(Stellera)多年生草本植物，是我国传统中药狼毒的正品，也是重 要的蒙药和藏药，有清热解毒、消肿、泻火、止溃疡、祛腐生肌之功 效。 本研究以瑞香科狼毒属狼毒的叶片为外植体，探讨了不同浓度的 2，4一D对愈伤组织诱导率的影响，得到了诱导愈伤组织的最佳2，4．D 浓度；进行了不同接种量的细胞生长动态研究，确定了增殖培养适宜 的接种量，并着重探讨了生长素类和细胞分裂素类对愈伤组织增殖培 养的效应，获得了愈伤组织增殖的最佳培养基配方；用比色法测定了 愈伤组织中总黄酮的含量，研究生长素和细胞分裂素类对愈伤组织总 黄酮累积的影响；采用DPPH自由基清除法探究了愈伤组织总黄酮提 取物的抗氧化活性。本研究为狼毒的开发利用奠定了基础。主要结论 归纳如下： 1．以狼毒的叶片为外植体，诱导愈伤组织的最佳2，4一D浓度为 1．Omg／L，诱导率可达98．33％，愈伤组织呈淡黄色，致密。 2。愈伤组织生长量的动态研究表明：鲜重和干重的生长曲线均 呈“S’’型，明显地分为：延迟生长期、指数生长期和衰减期。 3．单独使用2，4．D和KT对狼毒愈伤组织的增殖效应不明显并严 重褐化；单独使用NAA增殖效应明显但褐化较明显；单独使用6-BA 增殖效应很好但轻微褐化；单独使用TDZ增殖效应最好。生长素与 细胞分裂素组合对愈伤组织的增殖效应比单～的植物生长调节剂好。 4．499／ 瓶，是初始接种量的28．98倍，干重为0．619／瓶，为初始接种量的25．41 倍。 4．单独使用NAA和6-BA可促进愈伤组织中总黄酮的累积，而 培养基中附加不同浓度的TDZ时总黄酮的累积均低于NAA和6-BA。 总黄酮含量达10．779mg／g，明显高于野生狼毒根(总黄酮含量为 10．104rag／g)。 5．各样品总黄酮提取液都有明显的抗氧化活性，3．125}tl提取液 的DPPH自由基消除率为42．222％．91．143％，且与总黄酮含量相关， 19 相关系数为0．7 1 氧化活性高于野生狼毒根，且野生狼毒根总黄酮的体外抗氧化活性高 于抗坏血酸(Vc)。 关键词狼毒，愈伤组织，黄酮，抗氧化 ABSTRACT Stellera knownas chamaejasme，alsogelsemiumelegans(Inner the flowers Mongolia)，removingcarrots，swallowflowers(Hebei)，bread a and tothe Stellerainthe (Qinghai)，isperennialplant belongsgenus of istheauthenticmedicineofChinese Thymelaeaceae，which family traditionalherbandalsoisthe medicineof and important Mongolian Tibetan．Itcanclear heat，relieve toxicity,cureswelling，purgefire， removethenecrotic tissueorulcersand promotegranulation． Inthis leavesofStellera as