沙冬青种质资源及抗旱基因研究.pdfVIP

摘要 蒙古沙冬青(Ammopiptanthus 区的沙漠、荒漠区，是该区唯一的常绿阔叶灌木，具有很强的抗旱、 料，测定干旱胁迫下沙冬青幼苗叶片和根生理生化指标；采用454高 通量测序技术建立了沙冬青根转录本数据库，并进行了相关分析；采 用qRT-PCR技术检测沙冬青抗旱相关基因的表达模式，以揭示沙冬 青抗旱生理基础和分子机制。结果如下： MDA含量和REL与对照相比没有变化；经过24h胁迫处理，沙冬青 幼苗根的RWC与对照相比显著降低，而MDA含量和REL显著增加。 ， 胁迫处理醯，沙冬青幼苗叶片和根的脯氨酸含量均有大量积累。胁 迫条件下沙冬青幼苗叶片的SOD活性表现为先降低后上升，POD活 性略有增加，处理6h后CAT活性降低；沙冬青幼苗根中的SOD、 ， 性水平最高。上述研究结果说明，采用灌根法进行模拟干旱胁迫处理， 叶片和根中的相关生理响应特征不尽相同，根的反应较强。 应用454高通量测序技术得到沙冬青根转录组共672002条高质 912 366条，包括14 量(HQ)序列，平均长度279bp。拼接序列27 1 12 Mb。共977 个序列重叠群(contig)署H454条singleton，总长约14 个蛋白序列获得了注释，采焉GO功能富集分析分别从生物学过程、 缀臆组分黧分子功麓进行分类。并根据GO功麓富集分析，选择了响 应渗透胁迫、氧化胁迫、激素刺激和光信号刺激等4类共计27个抗 滤沙冬青撮为材料分析了表达模式，各塞响应酶方式不同。以lh和 就纛胁遗处理皆为上调表达且裙对表达量必2以上为标准确定为干旱 胁遗诱导酶基因，共计获得了4个基圜，分别编码糖苷永解酶家族蟹 融、过氧化物酶超家旗蛋白、谷胱甘肽过氧化物酶(㈣)和向光 反应性NPH3家族蛋国；以lh和72h胁迫处理誉为下调表达且相对 淡达量淹0．8戳下为标准确定炎干旱蓊追掷制酶基因，共计获褥了4 个基箧，分雾l编码麟永素家族蛋自(EPd914)、硫酸盐转运予 深入开展沙冬青抗旱机瑷积抗旱基因的研究夔定了基础。 美键谰： 沙冬青，干旱胁迫，抗氧化酶，转录缀，qRT-PCR ABSTRACT the broad—leafshrubinthenorthwestemdesertof As onlyevergreen shows resistanceto China，Ammopiptanthusmongolicusverystrong andcold。Inorderto the andmolecular drought explorephysical in mechanisms the tolerance underlyingdrought andbiochemicalcharacteristicsin analyzedphysiological A．mongolicus under stress。We seedlingdrought performedlarge—scale of root Roche／454 A。mongol