瑞氏木霉QM9414利用蔗渣发酵产纤维素酶的研究.pdfVIP

云南大学学报 (自然科学版)，2008，30(6)：620—624 CN53—1045／N IssN 0258—7971 JournalofYunnanUniversity 瑞 氏木霉 QM9414利用蔗渣发酵产纤维素酶的研究 伍 红 ，一，秦天莺 ，谭德勇 ，农 向 (1．西南民族大学 生命科学与技术学院，四川 成都 610041；2．云南大学 生命科学学院，云南 昆明 650091； 3．乐山师范学院化学与生命科学学院，四川 乐山 614000) 摘要：以蔗渣为培养基料，通过单因子及正交试验，对瑞 氏木霉 QM9414固体发酵产纤维素酶的产酶条件 进行了探讨．其优化的产酶条件为：甘蔗渣2．5g，麸皮 1g，加含 7．5g／L(NHa)2SO4的Mandels营养液 14mL (干物质 (g)与水 (mL)的比例为 1：4)，调初始pH4．0，30℃发酵 120h．在此优化条件下，每克干曲产纤维素酶 酶活力可达 8．26U． 关键词：蔗渣 ；瑞氏木霉QM9414；正交实验；固态发酵；培养条件优化 中图分类号：Q936 文献标识码：A 文章编号 ：0258—7971(2008)06—0620—05 甘蔗渣是制糖工业的主要副产品，是甘蔗机械 袋封装备用 ． 压制后的剩余部分．蔗渣的主要成分为 50．4％的 1．1．2 培养基 纤维素，28．5％的半纤维素，14．9％的木质素，2％ 斜面培养基：麦芽提取物2g，琼脂粉2g，H20 的灰分以及 1．59％的粗蛋 白llJ．由于其木质化程 100mL，pH 3．5． 度高，难以消化，因此很难作为动物饲料加以利用． 固体发酵培养基：以麸皮 1．5g，甘蔗渣2g， 长期以来大量的甘蔗渣都作为燃料烧掉或废弃，既 Mandels[j营养液 14mL作为基础培养基 ．培养基 浪费资源又污染了环境 ． 以 121℃灭菌30min后备用． 纤维素酶是降解纤维素为葡萄糖的一组酶的 1．1．3 主要仪器与设备 721B分光光度计 (上海 总称，在食品、医药、饲料、洗涤等行业中有广泛的 第三分光仪器厂)，sartorious电子精密天平 (北京 应用．纤维素酶生产中常利用纤维素含量高的秸 赛多利斯天平有限公司)，ceritrifuge5804R高速冷 秆、玉米芯等作为培养基，以微生物发酵获得纤维 冻离心机(日本 13立)，水浴锅，培养箱，酸度仪，血 素酶．与秸秆、玉米芯相比，蔗渣富含纤维素，且成 球计数板 ． 本更低，资源更丰富，因此更适合用做纤维素酶生 1．1．4 主要试剂 0．1mol／LDH4．8醋酸缓冲 产的培养基料．本文以瑞 氏木霉 oM9414为产酶 液，DNS试剂按文献[3]配制． 菌株，探讨了利用蔗渣作为培养基料生产纤维素酶 1．2 方法 的最佳条件，为甘蔗渣的有效利用和开发提供一条 1．2．1 培养条件 斜面培养条件为 30℃培养 新的途径 ． 192h．固体发酵培养条件为每个处理接入孢子悬 液含量为 1．2×10L 的菌液0．6mL，30℃培养 1 材料和方法 l20h． 1．1 材料 1．2．2 粗酶液的提取 向固体发酵培养物中加入 1．1．1 菌种 瑞 氏木霉 (Trichodermareesei) 10倍 0．1mol／L，DH4．8，HAc—NaAc缓冲液35mL， QM9414菌株，中科院微生物所保存并友情赠送．