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云南大学学报 (自然科学版),2008,30(6):620—624 CN53—1045/N IssN 0258—7971
JournalofYunnanUniversity
瑞 氏木霉 QM9414利用蔗渣发酵产纤维素酶的研究
伍 红 ,一,秦天莺 ,谭德勇 ,农 向
(1.西南民族大学 生命科学与技术学院,四川 成都 610041;2.云南大学 生命科学学院,云南 昆明 650091;
3.乐山师范学院化学与生命科学学院,四川 乐山 614000)
摘要:以蔗渣为培养基料,通过单因子及正交试验,对瑞 氏木霉 QM9414固体发酵产纤维素酶的产酶条件
进行了探讨.其优化的产酶条件为:甘蔗渣2.5g,麸皮 1g,加含 7.5g/L(NHa)2SO4的Mandels营养液 14mL
(干物质 (g)与水 (mL)的比例为 1:4),调初始pH4.0,30℃发酵 120h.在此优化条件下,每克干曲产纤维素酶
酶活力可达 8.26U.
关键词:蔗渣 ;瑞氏木霉QM9414;正交实验;固态发酵;培养条件优化
中图分类号:Q936 文献标识码:A 文章编号 :0258—7971(2008)06—0620—05
甘蔗渣是制糖工业的主要副产品,是甘蔗机械 袋封装备用 .
压制后的剩余部分.蔗渣的主要成分为 50.4%的 1.1.2 培养基
纤维素,28.5%的半纤维素,14.9%的木质素,2% 斜面培养基:麦芽提取物2g,琼脂粉2g,H20
的灰分以及 1.59%的粗蛋 白llJ.由于其木质化程 100mL,pH 3.5.
度高,难以消化,因此很难作为动物饲料加以利用. 固体发酵培养基:以麸皮 1.5g,甘蔗渣2g,
长期以来大量的甘蔗渣都作为燃料烧掉或废弃,既 Mandels[j营养液 14mL作为基础培养基 .培养基
浪费资源又污染了环境 . 以 121℃灭菌30min后备用.
纤维素酶是降解纤维素为葡萄糖的一组酶的 1.1.3 主要仪器与设备 721B分光光度计 (上海
总称,在食品、医药、饲料、洗涤等行业中有广泛的 第三分光仪器厂),sartorious电子精密天平 (北京
应用.纤维素酶生产中常利用纤维素含量高的秸 赛多利斯天平有限公司),ceritrifuge5804R高速冷
秆、玉米芯等作为培养基,以微生物发酵获得纤维 冻离心机(日本 13立),水浴锅,培养箱,酸度仪,血
素酶.与秸秆、玉米芯相比,蔗渣富含纤维素,且成 球计数板 .
本更低,资源更丰富,因此更适合用做纤维素酶生 1.1.4 主要试剂 0.1mol/LDH4.8醋酸缓冲
产的培养基料.本文以瑞 氏木霉 oM9414为产酶 液,DNS试剂按文献[3]配制.
菌株,探讨了利用蔗渣作为培养基料生产纤维素酶 1.2 方法
的最佳条件,为甘蔗渣的有效利用和开发提供一条 1.2.1 培养条件 斜面培养条件为 30℃培养
新的途径 . 192h.固体发酵培养条件为每个处理接入孢子悬
液含量为 1.2×10L 的菌液0.6mL,30℃培养
1 材料和方法
l20h.
1.1 材料 1.2.2 粗酶液的提取 向固体发酵培养物中加入
1.1.1 菌种 瑞 氏木霉 (Trichodermareesei) 10倍 0.1mol/L,DH4.8,HAc—NaAc缓冲液35mL,
QM9414菌株,中科院微生物所保存并友情赠送.
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