正交法优选山茱萸抗衰老有效部位的提取工艺.pdfVIP

南京中医药大学学报2008年 l1月第24卷第6期 JDURNALOFNANJINGTCM UNIVERSITY11of．24 ．6Nov．2008 正交法优选 山茱萸抗衰老有效部位的提取工艺 皮文霞 ，叶丽红 ，郭戎 ，王明艳 ，许桂玲 (南京中医药大学药学院，江苏南京 210046；南京中医药大学基础医学院) 摘要：目的 以马钱子苷和莫诺苷为指标，优化山茱萸抗衰老有效部位的提取工艺。方法 采用 I_9(34)正交法设计实 验，考察乙醇浓度、乙醇用量、回流次数、回流时间等4个因素对指标值的影响。结果 最佳提取工艺为：用8O％乙醇， 12倍量，回流提取2次，每次60min。结论 正交实验法用于优选山茱萸抗衰老有效部位提取工艺简便易行。 关键词：山莱萸；抗衰老有效部位 ；马钱子苷；莫诺苷；正交实验 中图号：R282．710．5 文献标识码：A 文章编号：1000—5005(2008)06一O4O6—02 山茱萸 (ComusoffieinalisSieb．etZucc．)是我 AgilentChem色谱工作站。瑞士 R．200旋转蒸发 国常用名贵中药，为山茱萸科植物山茱萸的干燥 仪；ShimazhuLibrorAEL-40SM 电子天平 (日本岛 成熟果肉，其味酸涩，性微温，具补益肝肾，涩精固 津)。 脱之功效。山茱萸主要含环烯醚萜苷、多糖、有机 1．2 试剂 、药品 酸、鞣质等成分。以莫诺苷(morroniside)及马钱子 甲醇 (色谱纯，德国Merck公司)；乙醇 (医 苷(1oganin)的含量较高 lj，药理研究表明山茱萸 用)；亚沸水临用前蒸制；莫诺苷、马钱子苷对照品 环烯醚萜苷类除具有降血糖及抗糖尿病并发症 2【J 为本实验室 自制。山茱萸新鲜药材购于河南省西 外，还具有抗衰老作用。本研究选择山茱萸抗衰 峡县产地，秋末冬初采收，及时除去果核，干燥。 老有效部位中莫诺苷和马钱子苷作为指标，采用 2 实验方法 (3)正交实验，以I-IPLC法测定两苷的含量，筛 2．1 正交实验设计 选提取工艺条件，为进一步的研究奠定基础。 选择乙醇浓度 (A)、乙醇用量(B)、回流次数 1 实验材料 (c)、每次回流时间(D)作为4个主要影响因素， 1．1 仪器 每一影响因素各选 3个水平进行试验，采用 高效液相色谱仪 Agilent1100型，G1312A 四 (34)正交表，以莫诺苷及马钱子苷的提取率为考 元泵，G1315BDAD检测器，G1379A在线脱气机， 察指标进行实验，设计因素和水平见表 1。 表 1 醇提工艺因素水平表 2．2 莫诺苷及马钱子苷的测定方法 2．2．1 样品溶液制备 液，于85℃水浴中按规定时间回流提取数次。提 依据正交设计表，称取山茱萸20．0g，置500 取液过滤，合并滤液。各取滤液 1OmL，水浴蒸 mL圆底烧瓶中，加人数倍量一定浓度的乙醇溶 干，用 甲醇定容至25mL备用。 收稿 日期：2008一o8—22；修稿 日期：2008—09—25 基金项 目：国家 自然科学基金 作者简介：皮文霞 (1968一)，女，安徽霍邱人，南京中医药大学副教授。*通讯作者：025 皮文霞，等 ：正交法优选山茱萸抗衰老有效部位的提取工艺 第 6期 _ _ _ — — 407 --·-—— 2．2．2 色谱条件 测得二者保留时间依次为7．011min，15．664min。 色谱柱：Lichrospher-C18(4．6mlnx250mm)；流 标准曲线回归方程：莫诺苷 l，=14609X一15．02， 动相：甲醇一水(30：70)；检测波长：240nm；柱温： r：0．9992，马钱子苷 Y=