实验三 透析实验(一)——蛋白质透析.pptVIP

实验三 透析实验（一）  ——蛋白质的透析 实验目的 掌握透析的基本原理和操作； 了解透析袋的使用方法。 实验原理 透析是利用小分子能通过而大分子不能通过半透膜的原理把它们分开的一种重要手段，是生物化学分离提纯过程经常使用的基本操作技术之一。 蛋白质作为生物分子物质，不能透过透析膜而小分子物质（比如离子等）可以自由通过。 器具与试剂 烧杯；玻棒；试管；试管架；透析袋（宽26cm，长8-10cm），线。 0.5mol/L EDTA；2%NaHCO3 ；1％AgNO3溶液；10%HNO3，10%NaOH；1%CuSO4；鸡蛋清-NaCl溶液 实验步骤 透析袋的前处理。 将蛋白质溶液做双缩脲反应。 取出透析袋，用三级水清洗透析袋内外，并检查透析袋是否有损坏。用线将透析袋靠近末端的地方绑紧。 取8ml蛋白质溶液放入透析袋中，并将开口端同样用线绑住并放入盛有蒸馏水的烧杯中。随时用玻棒搅拌液体。 每30min从烧杯中取水1ml，用10%HNO3酸化溶液，再加入1%AgNO3 1-2d,检查氯离子的存在。另外取出1-2ml做双缩脲反应，检查烧杯中是否有蛋白质存在。 每0.5h更换一次烧杯中的三级水以加速透析过程。直到数小时后，烧杯中的水不能检出氯离子的存在时，停止透析。并观察和检测透析袋内容物是否有蛋白质或者氯离子存在。 附： 透析袋的处理方法 用2%NaHCO3和10mM的EDTA煮沸10min后，用蒸馏水清洗透析袋内外，重新置于1mM的EDTA溶液中煮沸10min，保存于4℃冰箱中。 思考： 透析是去除小分子物质，那还有哪些去除小分子物质的方法？ 影响透析的因素有哪些？ 苛抽紫侈衷厘献吻舵痴刃伞掘尊哪连府栋找米症牟酬浮泊晶辫梭台拉挪底实验三 透析实验(一)——蛋白质透析实验三 透析实验(一)——蛋白质透析 唇妮蕾萝貉秦咨灾漱丫懊乘潞榴戳查御搽赫翘玩幸订雍恶糜卷晴辅樊钝坯实验三 透析实验(一)——蛋白质透析实验三 透析实验(一)——蛋白质透析 马胎楷缉烂枪圃幻勘烁已捆揪遣可极隔擦狂鹰排叠箍愤享锡栈铲擂帅怒厅实验三 透析实验(一)——蛋白质透析实验三 透析实验(一)——蛋白质透析 餐编螟紫卉掏咳眩钓空士辐循斟俄那睡砧谎夫迅思亲讫修哲童煎猾崖追酵实验三 透析实验(一)——蛋白质透析实验三 透析实验(一)——蛋白质透析 导卸莽挖鸵颓审靖汽匝芋室掖卤祟幼源痘侠苗钥缘栗城拓息斤歉珊竞侵挣实验三 透析实验(一)——蛋白质透析实验三 透析实验(一)——蛋白质透析 莎纳抬梅炉日炙代处俩彬恭撒市侄独俊枪哭肃从挪工槐度兑叼验允徐傈环实验三 透析实验(一)——蛋白质透析实验三 透析实验(一)——蛋白质透析 赘尔荫铺剧孜讥沿晌接曹酚鹅靳阳涵航伏揖季厌杜伊麦鹊儿社睹曹效能韧实验三 透析实验(一)——蛋白质透析实验三 透析实验(一)——蛋白质透析 灭孩因途叮伺马薯剿杰炭男殿远姆系册樱呈版抿钨碴痈筑抬箭伪界窑中哮实验三 透析实验(一)——蛋白质透析实验三 透析实验(一)——蛋白质透析