安徽工业大学分子生物学实验讲义 实验一.pdfVIP

安徽工业大学 分子生物学实验讲义 主编：谢峻 2013-8-20 目录 目录2 实验一 分子生物学常用到的仪器及使用方法3 实验一 分子生物学常用到的仪器及使用方法 一、实验目的 1. 了解分子生物学实验的常规仪器、设备、耗材； 2. 掌握常用仪器的功能和使用方法； 3. 掌握单道移液器的使用方法和技巧；掌握移液器的使用和维护保养注意事项。 二、实验内容 常规仪器： （一）温度控制系统： 1. 冰箱：根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰 箱，最常使用的有：4 ℃、-20℃、-80℃冰箱。 4 ℃ 适合储存某些溶液、试剂、药品等。 -20℃ 适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和 DNA 、蛋白质样 品等。 -80℃ 适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液 等的保存。 0-10℃ 适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。 2. 液氮罐：有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速 冻和长期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（-196℃）具有经济、 省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。 3. 培养箱： 37℃生化恒温培养箱：用于细菌的固体培养。 CO2培养箱：适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2 （通常5% ），用 来维持培养液的酸度（pH值）。 37℃恒温空气摇床：可进行液体细菌的培养。 4. 水浴锅：用于保温。 25-100 ℃ 水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。 25-100 ℃ 水浴箱用于常规试验。 5. 烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA 方面的实验用具，需要在250 ℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45 ℃的烤 箱中进行烘干。 （二）水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高。 1. 蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。双蒸水、三蒸水配液，许多实验要去离 子水。多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质，不能完全除去水中溶解的 气体杂质（Mn2+ 、Cu2+ 、Zn2+ 、Fe3+等）。 2. 离子交换器：用离子交换法制取的水，称去离子水。去离子不能除去水中的非离 子型杂质，其中常含有有机物。 3. 超纯水：采用多级过滤、高性能离子交换单元、超滤过滤器、反渗透技术、紫外 灯、除TOC装置等多种处理方法，使电阻率达到18.2 mΩ ·cm （25 ℃）。 4. 其他常用水： 中国国家实验室分析用水标准（GB6682-92 ） 指标名称 一级水 二级水 三级水 电阻 MΩ ·cm （25 ℃） 10 mΩ 1 mΩ 0.2 mΩ 可氧化物（以 O 计）mg/L - 0.08 0.40 蒸发残渣（mg/L ） - 1.0 2.0 （三）菌消毒设备：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。 1．高压蒸汽灭菌锅：用于小批量物品的随时消毒。大批实验物