抗禽流感病毒免疫相关基因的筛选与鉴定.PDF

中国农业科学 2008,41(1):252-258 Scientia Agricultura Sinica 抗禽流感病毒免疫相关基因的筛选与鉴定 1 1,2 2 1 苗向阳 ，丁兆忠 ，孙世铎 ，于忠娜 1 2 （中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100094 ； 西北农林科技大学动物科技学院，陕西杨凌 712100 ） 摘要： 【目的】研究抗禽流感病毒免疫的分子机制，发现新的抗禽流感病毒免疫相关基因，为抗禽流感转基 因育种的研究奠定基础。【方法】随机选取40只30日龄AA 白羽肉鸡，其中20只鸡注射禽流感H5亚型禽流感灭 活疫苗，另 20 只未注射疫苗鸡作为对照，在注射后第 9 天取脾脏保存在液氮中。应用 mRNA 差异显示技术，结合 反向northern dot blot鉴定技术，来筛选注射疫苗组和未注射疫苗组的差异表达基因。【结果】筛选出13条差 异表达 EST，其中未注射疫苗组 4 条，注射组 9 条表达量增高。应用 BLAST 工具将 EST 对核酸数据库 nr 和 dbEST 中所有序列进行了同源性分析。DD3、DD4、DD6、DD9、DD11、DD12与已有核酸数据库中的基因克隆或EST具有较 高相似性，为已知的EST，但功能未知。DD10、DD13与鸡核糖体蛋白L7a 基因具有很高的相似性。DD1、DD2、DD5、 DD8为新的EST，提交到GenBank，分别获得登录号为EB714185、EB714186、EB714187、EB714188。【结论】本研 究筛选出的鸡核糖体蛋白 L7a 基因和其它 EST 对应的未知功能基因可以作为抗禽流感病毒研究中的候选基因，其 具体的功能有待今后进一步研究。 关键词：鸡；禽流感；mRNA差异显示；表达序列标签 Screening and Identification of Anti-Avian Influenza Virus Immune-Related Genes 1 1,2 2 1 MIAO Xiang-yang , DING Zhao-zhong , SUN Shi-duo , YU Zhong-na 1 2 ( Institute of Animal and Veterinary Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100094; College of Animal Science and Technology, Northwest Science and Technology University of Agriculture and Forestry, Yangling 712100, Shaanxi) Abstract: 【Objective 】This study was carried out to explore the molecular mechanism of inactivated influenza virus vaccine immunity and find new candid