检测人体血清中蛋白质组分.docVIP

检测人体血清中的蛋白质组分 介绍 利用毛细管电泳法可检测人体血清中相对的白蛋白和球蛋白的含量。 测量方法 毛细管电泳法检测人体血清中白蛋白和球蛋白的含量是基于这些物质在电场中因电泳淌度的不同实现有差别的迁移和分离。定性和定量分析蛋白质是通过直接测定该物质在215-220 nm区域内的紫外吸收。 血浆中蛋白质组分的参考值 在血清中蛋白质在总量中所占百分比的参考值列于下表。 组分 占总蛋白质含量，% γ -球蛋白（ γ -Gl） 10.7-19.2 β -球蛋白（ β - Gl） 8.6-13.7 α2 -球蛋白（ α2 - Gl） 5.2-10.7 α1 -球蛋白（ α1 - Gl） 3.7-7.8 白蛋白（ Alb ） 54.7-68.7 毛细管电泳的优点 与其它方法相比，测定血清中蛋白质所使用的电泳和醋酸纤维素和琼脂糖凝胶，毛细管电泳有几个优点： 没有特别的样品制备 实时检测 易于使用 定量测定 低的成本分析 设备与试剂 以下设备和试剂在测量中被使用： CAPEL?-105毛细管电泳仪 蒸馏水 白蛋白 氢氧化钠，超级纯 硫酸，超级纯 四硼酸钠，超级纯 十二烷基硫酸钠(SDS)，超级纯 在WINDOWS?98/ME/NT/2000/XP系统下安装采集和处理色谱数据的ChromSpec?软件包可实现对数据的采集、收集、处理和输出。 前处理步骤 前处理步骤包括：取样和样品准备，毛细管调试，辅助和校准溶液的准备，CAPEL?毛细管电泳仪的校正。 测量步骤 样品收集 样品(静脉血)的收集必需按照临床要求。执行标准条例获得血清。 样品准备 分析前，血清必需用蒸馏水稀释(稀释比 50:1)，彻底搅拌并离心。 毛细管的调试 每次清洗毛细管10分钟。依次用浓硫酸，蒸馏水、氢氧化钠(1 mol/l)，蒸馏水，缓冲液冲洗。 测量 采用毛细管电泳法在CAPEL? -105毛细管电泳仪上使用日常惯例，分析预备溶液。 数据处理 ChromSpec?软件输出一份白蛋白和球蛋白的含量(%)报告。 实例分析 样品： 人体血清(正常) 缓冲剂：10 mM硼酸，5 mM SDS,pH 9.2 毛细管：LEFF/LTOTAL 50/60 cm，ID 75 μm 注射量：150 mbar*S 电压： 15kV 测量： 215 nm，直接