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第5 章 CELLQUEST 軟體使用手冊 學習本章後應能夠： 真實血樣之3 色螢光染色技術 用CellQuest 從流式細胞儀收取3 色樣本 用CellQuest 從流式細胞儀分析3 色樣本 應用Quadrant （象限）產生統計 將統計結果輸出爲試算表 應用Region （區）和Gate （門）產生統計 BD Biosciences, COE 5-1 5.1. CELLQuest 軟體 1.1 概述 CELLQuest 軟體從流式細胞儀上進行收取和分析資料的通用軟體。使用者可藉由 CELLQuest 軟體來從事儀器之調整與設定，可用以進行細胞檢品之檢驗測量，CELLQuest 軟體同時是細胞儀的資料處理系統內的必要軟體。 在資料分析方面，CELLQuest 軟體提供使用者雙色或多色分析功能，可以定量各類細 胞族群的百分比，細胞受染的螢光強度，也可以製作一維直方圖、二維散點圖、二維密度圖、 二維等高線圖、及三度空間圖譜，並且可作文字處理之中間插圖，無需再剪貼拼湊，適用于 論文發表，及會議報告使用。CELLQuest 軟體功能強大且靈活，並與Macintosh 的多工環 境完全相容。分析原始資料所得的統計資料，也可以輸出到 IBM-PC 相容的軟體，例如， EXCEL, PowerPoint, Lotus 123, SigmaPlot, 進行再統計分析或繪圖。 1.1.1收取 (Acquisition) 即收取並儲存流式細胞儀上資料的過程。在收取前，需用您的樣本來最佳化儀器的條件。 1.1.2分析 (Analysis) 將收取的資料進行進一步分析。在分析時 ，將讀取資料檔案，然後可畫Region (區) 、 設置Marker (界限) 、和進行統計。在CellQuest 中，可畫單參數直方圖、雙參數散點圖、 密度圖和等高圖。 1.1.3從收取到分析 (AcquisitionAnalysis) 在CellQuest 中，從收取到分析的功能允許在資料收取結束後可從收取圖轉換到分析 圖。剛剛收取的資料及在收取時限定的格式出現在圖中，如Region, Marker 等。 BD Biosciences, COE 5-2 1.2 工具板 工具板可用來畫圖、Region, Marker 和文字等。點擊選擇。工具板按 鈕 1. 等高圖：點擊，可畫等高圖，可自定義圖的大小。 2. 選擇：點擊，可選擇一個或多個目標，進行改大小或移動。 3. 3 維圖：點擊，可畫3 維圖，可自定義圖的大小。 4. 直方圖：點擊，可畫直方圖，可自定義圖的大小。 5. 密度圖：點擊，可畫密度圖，可自定義圖的大小。 6. 散點圖：點擊，可畫散點圖，可自定義圖的大小。 7. 直方圖 marker ：點擊，可在直方圖上定位 Marker 的左邊界和右邊界。 8. 象限 marker ：點擊，可在散點圖、密度圖和等高圖上定位 marker 。 9. 縮小：點擊，然後點擊圖，將放大圖縮小到原大小。 10. 放大：點擊，然後點擊圖，將縮小圖放大到原大小。 11. 矩形 region ：點擊，然後在散點圖、密度圖和等高圖中點擊，然後拖動對角線至所需 大小。 12. 多邊形 region ：點擊，然後在散點圖、密度圖和等高圖中點擊形成起始點，然後拖動 滑鼠畫出多邊形頂點並在起始點處點擊完成多邊形 region 。 13. 直方圖 region ：點擊，可在直方圖上定位region 的左邊界和右邊界。 14. 橢圓形region: 點擊，然後在散點圖、密度圖和等高圖中點擊，然後拖動對角線至所需 大小。 15. 箭頭：點擊，然