第二讲 色谱基本理论.pptVIP

第二讲 色谱基本理论 一、气相色谱流出曲线 （2）用体积表示的保留值 3. 相对保留值r21 4. 区域宽度 二、容量因子与分配系数 三、塔板理论-柱分离效能指标 有效塔板数和有效塔板高度 塔板理论的特点和不足： 四、 速率理论-影响柱效的因素 1. 速率理论的提出 1952年Lapidus等对填充柱色谱过程做了较详细的研究，指出色谱过程中引起组分宽度扩张的因素主要是： 1）沿柱流动方向的纵向扩散效应； 2）组分在两相间的平衡不能瞬时达成，即它在两相交换时传质速度是有限的。 在众多研究的基础上，由Van Deemter提出一个表达式。 2. 填充柱Van Deemter方程 也可描述为： 3. 毛细管柱的描述： r0为可描述为毛细管内半径 4. 液相色谱的表达式： 各项可具体表述为： 5. 速率理论图示： 最低板高： 最佳流速： 1. 涡流扩散项－A 2. 分子扩散项—B 3.传质阻力项— C 4. 载气流速与柱效-最佳流速 5. 速率理论的要点 五、 分离度 分离度的表达式： 例题1： 例题2： 一、色谱定性鉴定方法 二、色谱定量分析方法 一、色谱定性鉴定方法 3.保留指数 保留指数计算方法 3.与其他分析仪器联用的定性方法 二、 色谱定量分析方法 2. 定量校正因子 3. 常用的几种定量方法 （1）归一化法： （2）外标法 （3）内标法 内标法特点 色谱定性、定量分析方法 1.利用纯物质定性的方法 利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。 利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。 2.利用文献保留值定性 相对保留值r21：相对保留值r21仅与柱温和固定液性质有关。在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据，可以用来进行定性鉴定。 又称Kovats指数（Ⅰ），是一种重现性较好的定性参数。测定方法： 将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。 其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有Z和Z＋1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示： 小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱仪联用仪； 组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B A C D 1. 峰面积的测量 （1）峰高（h）乘半峰宽（Y 1/2）法：近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的0.94倍： A = 1.064 h·Y1/2 （2）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高0.15和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积： A = h·（Y 0.15 + Y 0.85 ）/ 2 （3）峰高乘保留时间法：在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积： A = h·b·tR （4）自动积分和微机处理法 试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比，即： m i = fi ·Ai 绝对校正因子：比例系数f i ，单位面积对应的物质量： f i =m i / Ai 定量校正因子与检测器响应值成倒数关系： f i = 1 / Si 相对校正因子f ’i ：即组分的绝对校正因子与标准物质的绝对校正因子之比。 当mi、mS以摩尔为单位时，所得相对校正因子称为相对摩尔校正因子（f ’M）,用表示；当mi、mS用质量单位时, 以（f ’W）,表示。 特点及要求： 归一化法简便、准确； 进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大； 仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。 * * 1.基线 无试样通过检测器时，检测到的信号即为基线。 2.保留值 （1）时间表示的保留