HPLC测定糖尿乐胶囊中人参皂苷Rg1含量.docVIP

HPLC测定糖尿乐胶囊中人参皂苷Rg1含量【摘要】 目的 建立HPLC测定糖尿乐胶囊中人参皂苷Rg1含量的方法。方法 选用Diamonsil(钻石)柱(4?6×250 mm,5μm);乙腈?0?05%磷酸(19:81)为流动相;检测波长为203 nm;流速1?0 ml/min。结果 人参皂苷Rg1在0?9952~4?9760 ug范围内,呈良好的线性关系。结论 本法简便、准确,适用于糖尿乐胶囊中人参皂苷Rg1的含量测定。? 【关键词】 高效液相色谱法;糖尿乐胶囊;人参皂苷 HPLC Determination tangniaole capsules in Rg1 Content LI Ying?lian, JIA Gui?long, Che Xuan. Pharmacy department of Dongfeng county hospital,Jilin 136300,China 【Abstract】 Objective to establish HPLC determination tangniaole capsules in Rg1 content? Methods Diamonsil ( diamond ) column (4?6 × 250 mm, 5 μ m); acetonitrile ?0?05% phosphoric acid (19: 81) as mobile phase; detection wavelength for 203nm; velocity 1?0 ml/min? Results ginsenoside Rg ??1? in 0?9952~4?9760 μg range,had good linear relationship?Conclusion this method is simple, accurate, suitable for tangniaole capsules in Rg1 determination?? 【Key words】 HPLC, tangniaole capsule, ginsenoside ? 本品处方中,人参为传统名贵中药,经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分之一,它具有人参根的主要生理活性。且采用HPLC方法测定人参皂苷含量方法比较成熟,故本品采用灵敏度高,重复性好的高效液相色谱法,以人参皂苷Rg1为指标,测定其含量。? 1 方法? 1?1 仪器与试药 高效液相色谱仪(岛津LC20A、在线脱气、SPD20A检测器Diamonsil(钻石)柱(4?6×250 mm,5 μm),乙腈为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯,人参皂苷Rg1对照品购自中国药品生物制品检定所(批号:110736?200424)? 1?2 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品适量,加甲醇制成每1 ml含0?25 mg的溶液,即得。? 供试品溶液的制备??[1]?取本品内容物5 g,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷适量,回流提取至无色,弃去三氯甲烷液,取出滤纸包,吹干,加甲醇适量,回流提取至无色,提取液蒸干,残渣加正丁醇饱和的水30 ml使溶解,转移至分液漏斗中,加水饱和的正丁醇振摇提取5次(30 ml、20 ml、20 ml、20 ml、15 ml),合并正丁醇液,加正丁醇饱和的氨试液60 ml洗涤一次,弃去氨液,分取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至5 ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。? 测定法 分别精密吸取对照品溶液10 μl与供试品溶液20 μl,注入液相色谱仪,测定,即得。? 1?3 方法学考察? 1?3?1 色谱条件的选择??[3]? 检测波长 采用DAD检测器对人参皂苷Rg1进行全波长扫描,结果人参皂苷Rg1在流动相条件下最大吸收波长为203nm,故确定样品检测波长为203 nm。? 流动相的考查 乙腈?0?05%磷酸(19?∶?81),试验结果表明,使用此种组合流动相人参皂苷Rg1与其他色谱峰分离较好,且能达到基线分离,故选择乙腈?0?05%磷酸(19:81)为流动相??[2]?。? 色谱柱的考查 在上述流动相条件下,确定色谱柱为DiamonilC18色谱柱(5μm 4?6×250 nm,迪马公司,结果表明采用此色谱柱人参皂苷Rg1与其他色谱峰分离较好,且能达到基线分离。? 1?3?2 阴性对照试验 称取处方中除人参以外的其他各味药材,制备阴性对照品,并按上述【供式品溶液的制备】项下供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液,进行测定。结果见图(图略)。? 试验结果表明,阴性对