毛细管电泳分离影响因素及条件优化By flysky97.PDF

毛细管电泳分离影响因素及条件优化 By flysky97 原文来自本论坛，稍加整理，并加入箭头标志，希望大家进一步确认！原文 见链接： 分离条件的优化是电泳实验中最重要也是最难的工作。可按以下途径入手： 分析样品的来源、类型、组成及其生物和理化性质；据样品的性质，选择分离模 式，确定检测方法；据样品解离常数计算最佳 pH ；据所需 pH 选择缓冲体系， 进一步优化 pH 、缓冲液浓度等；优化其他参数，如分离电压和温度等；确定是 否需要添加剂或非水溶剂等。 对于实验条件的优化，影响分离的因素非常关键。缓冲溶液的类型、pH 、 浓度（离子强度）等是最为重要的几个因素。相同的 pH 下，不同缓冲体系的分 离效果可能相差甚远。缓冲试剂及pH 调节剂的浓度也需要优化。缓冲溶液要有 一定的pH 调节范围和足够的缓冲容量；尽量选择浓度高而产生电流小的缓冲溶 液；缓冲液的表观淌度（单位电场强度下离子的平均电泳速度称为淌度）与样品 组分接近。分离效果的评价上需关注电渗流、分离速度、分离选择性、分离度等。 电渗流可控制组分的迁移方向和速度，进而影响分离效率和重现性，所以电 渗的控制是电泳研究的关键。如下公式所示，一般地，所有能改变电动势ξ、介 电常数ε和粘度