河南大学医学院试验教案.DOC

河南大学医学院实验课教案首页 实验名称 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质 授课对象 教学目标 学时分配 大体内容与时间安排：(8学时) 掌握血清蛋白SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理 讲授时间60分钟 理解电泳过程中的三种效应 讲授时间30分钟 讲授时间90分钟 学生操作时间310分钟 授课重点 1.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理 2.制胶、加样、电泳、染色、脱色等基本操作。 授课方法 课前准备 讲授为主，结合提问、总结，指导纠正 教材 《生物化学 主编 人民卫生出版社凝胶制备、加样、电泳mm ）, 用于隔绝空气，使胶面平整。室温下静置约30～60 min。当凝胶完全聚合时，可看到清晰的胶水界面。 (2)浓缩胶的制备 用滤纸吸去分离胶上层多余的水，但不要碰破胶面。再用注射器取浓缩胶缓冲液洗涤胶面数次，即可制备浓缩胶。取凝胶贮备液lml，浓缩胶缓冲液1．25ml、蒸馏水7．5ml、100g／L SDS 0．1ml、TEMED(或DMAPN)0．05ml、100g／L过硫酸铵0．1ml，混匀，立即用细长头滴管将凝胶溶液加到分离胶的上方，约1cm厚，上面同样加一层水，静置40min，使其充分聚合。凝胶聚合