流式细胞仪试验方法及常见问题分析.PPT

流式细胞仪实验方法及常见问题分析 中心实验室 李 琳 2012.09.19 流式细胞仪（Flow Cytometer）是集多种技术为一体的新型高科技仪器。 流式细胞术(flow cytometry, FCM)是以流式细胞仪为检测手段，对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒同时进行多参数定量分析和分选的高新技术。 研究对象：各种细胞、微生物、人工合成微球等。 BD FACSAria 中心实验室的流式能做什么？ 流式实验需要做哪些准备和工作？ 流式细胞仪检测范围 细胞结构 细胞功能 细胞大小 细胞粒度 细胞表面面积 核浆比例 DNA含量与细胞周期 RNA 含量 蛋白质含量 染色体分析 特异性抗原（细胞表面/胞浆/核） 细胞活性 细胞因子 酶活性 激素结合位点 细胞受体 凋亡 在上述信号基础上的细胞分选（未开展分选） 单细胞标本的制备 标记荧光抗体 检 测（老师） 数据分析 FCM 实 验 流 程 一、单细胞标本的制备 （关键步骤） 6种标本来源 ① 外周血单细胞悬液制备 新鲜的外周血是天然的单细胞悬液，需要用红细胞裂解液裂解RBC。 ② 培养细胞的单细胞悬液制备 ③ 脱落细胞的单细胞悬液制备 脱落细胞应去除取材伴随的杂质后再制备细胞悬液。 对临床诊断和治疗很有意义，比如脱落的肺泡细胞。  ④ 新鲜实