e - cadherin 基因在卵巢瘤高低转移细胞中的差异 - 大连医科大学学报.pdfVIP

第 29 卷第5 期 大连医科大学学报 Vol.29 No.5 2∞7 年 10 月 Journal of Dalian Medical University Oct.2∞7 E - cadherin 基因在卵巢瘤高低转移细胞中的 差异表达及其机制的探讨 宋阳，胡 军，郝立宏，赵瑾瑶，宫琳琳，邵淑娟 (大连医科大学组织胚胎学教研室，辽宁大连 116044) 摘要: [目的]探讨上皮性细胞和附分子在人卵巢浆液性囊腺癌高、低转移细胞株 HO -8910 和 HO -891OPM 的表 达情况。[方法]采用蛋白印迹及免疫细胞化学方法检测 2 种细胞株的 E - cadherin 蛋白表达差异，用 RT -PCR 法 检测 2 种细胞株的 mRNA 表达差异，用 PCR 及基因测序法检测基因突变情况。[结果] E - cad 蛋白及 mRNA 在 HO -8910 中表达，在 HO -891OPM 中不表达。在 E - cadherin 基因外显子6 -9 未发现突变。[结论] E - cad 的表 达可能与肿瘤的转移能力负相关。 关键词:E -钙和附蛋白;基因突变;肿瘤转移 中图分类号:R737.31 文献标识码:A 文章编号:1671 -7295(2007)04 -0425-04 卵巢癌是严重危害女性健康的恶性肿瘤之一。转移是 研究所，在 37 t: ,5% CO2，含 10% 小牛血清的 Sigma 公司的 RPMI -1640 培养基中常规培养，3 -4 d 传代 1 次。 恶性肿瘤生物学行为的一种特征，也是临床治疗恶性肿瘤失 1. 2 免疫细胞化学分析 败的主要原因。肿瘤的转移是一个多因素、多步骤并且涉 及细胞间相互作用的复杂病理生理过程，它包括癌细胞在原 待细胞生长至对数生长期时，做细胞爬片，采用常规 SP 发灶增殖、脱落、侵入转移点继续增殖等。转移的形成需多 方法进行免疫细胞化学染色。免疫细胞化学试剂盒购自福 州迈新公司，鼠抗 E - cadherin 单克隆抗体为 Santa Cruz 公 种因素协同作用，如肿瘤转移的微环境、肿瘤血管的生戚、秸 司，工作液浓度为 1: 1∞， 37t:孵育 2 h ，以 PBS 代替一抗做 附分子等等。 HO -8910 是浙江肿瘤所以分化差的卵巢乳头状浆液性 阴性对照，苏木精复染细胞核，树胶封片。 结果判定:E - cadherin 阳性表达结果为定位于细胞膜 囊腺癌患者腹水为材料建立的体外培养的人卵巢浆液性囊 腺癌细胞系[1] 。在高转移人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的 和(或)细胞质内，为粗细一致的棕黄色颗粒，显色强时为棕 基础上，取该模型移植瘤组织在体外贴壁培养，又建成高转 褐色。使用 Media Cybemetics , Inc. 公司的 Image - Pro Plus 移人卵巢癌体外细胞 HO - 891OPM[2] 。研究表明:HO - 4.5 图像分析软件处理显微镜图像，每张片随机选取5 个高 8910PM 是一株较母系更具侵袭和转移生长潜能的细胞株。 倍视野，进行免疫细胞化学染色阳性细胞灰度值的计算。 HO -89