苗药新药舒儿腹贴提取纯化工艺探究.docVIP

苗药新药舒儿腹贴提取纯化工艺探究摘 要 目的：优选苗药新药舒儿腹贴中处方药材的最佳挥发油提取工艺及提取液的纯化工艺。方法：以挥发油的收率为测评指标优选舒腹儿贴处方药材的挥发油提取工艺；以浸膏中的胡椒碱的含量为测评指标，采用正交试验设计法优选提取挥发油后获取的水提液进行醇沉的纯化工艺。结果：最佳挥发油提取工艺为加入10倍量的水浸泡2h后采用水蒸气蒸馏法提取8h；最佳的纯化工艺采用水提醇沉的纯化方法，将药液浓缩至1g原药材/mL，体系醇浓度调至70％，4℃冷藏8h。结论：优化后提取工艺获取的挥发油收率高 ,最佳的纯化工艺有效成分胡椒碱得到最大限度的保留与富集，验证试验表明该提取纯化工艺稳定、可行。? 关键词 舒儿腹贴 挥发油 胡椒碱 提取工艺 纯化工艺 水提醇沉工艺?? 苗药新药――舒儿腹贴是由贵阳中医学院苗医药专家邱德文教授多年的经验方经剂型改进而成的现代制剂，主要由大果木姜子油、胡椒、丁香、白术、吴茱萸、肉桂、冰片7苗药及中药组成。舒儿腹贴具有温中健脾，助阳止泻，行气止痛的功效，临床主要应用于小儿脾胃虚寒所致泄泻、腹痛及消化不良等证，疗效显著。因挥发油是方中各药材共有的有效部位，而胡椒碱作为方中主药胡椒的有效成分［1］，具有镇静、止痛的作用［2］。故本实验以挥发油得率为指标，采用单因素考察的方法优选挥发油提取的最佳工艺；以浸膏中胡椒碱的含量为测评指标，采用正交试验设计法优选水提液的最佳纯化工艺。? 1 仪器与试药? 高效液相色谱仪Waters600型（美国Waters公司）；Diamonsil C18色谱柱(美国迪马公司)；KQ3200DE型医用数控超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司 )；DZF-6000型真空干燥箱（上海基玮试验仪器设备有限公司）；DFY-300型摇摆式中药粉碎机（温岭市林大机械有限公司）；AUW120D电子分析天平（日本岛津公司）；药材均购于贵州济仁堂药业有限公司 ,经贵阳中医学院中药鉴定教研室刘?教授鉴定为正品,均符合2005版《中国药典》一部［3］的有关规定；色谱甲醇（天津科密欧化学试剂有限公司，批号；胡椒碱对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号:0775―9702）；水为重蒸馏水；其余试剂为分析纯。 2 方法与结果? 2．1 挥发油提取工艺的优选? 2．1．1 粉碎粒度确定 该处方中药材均含挥发性成份，提取过程中粉碎粒度过细常会发生糊化现象，为了能更有效提取而又不造成药材糊化，我们选择将药材制成粗粉后进行提取。? 2．1．2 浸泡时间研究 按处方称取吴茱萸，胡椒，肉桂，丁香，白术总计31．5g药材，置于500mL烧杯中，加入315mL水后密封，分5组。分别标识为浸泡0．5h, 1h, 1．5h, 2h, 2．5 h组,称取并记录吸水后药材重量。结果见表1，浸泡2小时后药材的吸水率不再有明显增加，故选择2h为最佳浸泡时间。? 2．1．3 挥发油提取时间的研究 按处方称取吴茱萸，胡椒，肉桂，丁香，白术总计700g药材，置于5000mL圆底烧瓶中，加10倍量体积的水，浸泡2h,分别采用水蒸气蒸馏法提取挥发油至油量不再增加,每隔1h量取挥发油体积。结果见表2,结果表明提取到8h后挥发油的量不再增加，因此选择8h为挥发油最佳提取时间。 2．1．4 加水量的确定 按处方称取吴茱萸，胡椒，肉桂，丁香，白术总计31．5g药材3份，分别加入6倍、8倍、10倍水,浸泡2h，提取挥发油8 h后量取挥发油体积，计算挥发油得率=挥发油量/药材量×100?。结果见表3，结果表明加入10倍量水的提取挥发油的收率最大，故选择加入10倍量的水为最佳工艺参数。? 综合上述结果，以挥发油量为考察指标，通过单因素考察合并综合分析，舒儿腹贴挥发油最佳的提取工艺为将药材粉成粗粉，加10倍量水，浸泡2h，水蒸气蒸馏法提取8h。? 2．2 胡椒碱含量测定方法的建立? 2．2．1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇?水(77∶23)为流动相;流速为1．0 mL/min检测波长 434 nm;柱温30 ℃。? 2．2．2 对照品溶液配制 取胡椒碱对照品加甲醇制成浓度为0．1632 mg/mL的对照品溶液。? 2．2．3 样品溶液制备 精密称取0．05g浸膏粉，置于25mL棕色容量瓶中，加入甲醇约20mL，超声30min,放冷，加甲醇至刻度，摇匀，用0．45μm微孔滤膜滤过，即可。? 2．2．4 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液（醇沉供试品10μl，醇提供试品5 μl），注入液相色谱仪。? 2．2．5 线性化范围考察 精密称取减压干燥后的胡椒碱对照品，用甲醇溶解制成浓度为0．1632 mg/mL对照品溶液。