基于ITS序列的伞菌类药用食用真菌的DNA条形码鉴定研究 - 世界中医药.PDF

世界中医药　２０１６年５月第１１卷第５期 ·７９１· 基于ＩＴＳ序列的伞菌类药用食用真菌的 ＤＮＡ条形码鉴定研究 １ １ １ ２ ２ 刘　悦 　汤　欢 　李西文 　陈增华 　雷志勇　向　丽 （１中国中医科学院中药研究所，北京，１００７００；２北京千菌方菌物科学研究院，北京，１００００５） 摘要　目的：伞菌类真菌物种繁多、生物多样性丰富，包括多种重要的药用、食用真菌以及有毒真菌。因此，对该类群的快 速、准确鉴定，对于新的药用食用真菌资源的发现，以及对真菌毒素危害的防治都具有重要意义。方法：本研究以伞菌类 １３个科２３个属５０个物种，共计８４份样本的真菌为研究对象，采用真菌通用引物ＩＴＳ５和ＩＴＳ４，对其核糖体ＤＮＡ的内转录 间隔区（ＩｎｔｅｒｎａｌＴｒａｎｓｃｒｉｂｅｄＳｐａｃｅｒ，ＩＴＳ）进行 ＰＣＲ扩增和测序。通过比较不同真菌的序列长度、碱基构成，同时利用 ＢＬＡＳＴ比对法和建树法对其进行鉴定。结果：伞菌类真菌的序列长度在４６３～７５１ｂｐ之间，平均 ＧＣ含量在３７１％ ～ ５９４％之间。通过与ＧｅｎＢａｎｋ中序列的比对分析以及系统进化邻接（Ｎｅｉｇｈｂｏｒｊｏｉｎｉｎｇ，ＮＪ）树结果，可以在种级水平上鉴定 各个真菌物种。结论：基于ＩＴＳ序列的ＤＮＡ条形码可以快速、准确鉴定伞菌类真菌，具有重要的应用价值。 关键词　药用真菌；食用真菌；伞菌类；ＤＮＡ条形码；ＩＴＳ ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌａｎｄＥｄｉｂｌｅＦｕｎｇｉ（Ａｇａｒｉｃａｌｅｓ）ＴｈｒｏｕｇｈＩｎｔｅｒｎａｌＴｒａｎｓｃｒｉｂｅｄＳｐａｃｅｒＢａｒｃｏｄｅ １ １ １ ２ ２ １ ＬｉｕＹｕｅ，ＴａｎｇＨｕａｎ，ＬｉＸｉｗｅｎ，ＣｈｅｎＺｅｎｇｈｕａ，ＬｅｉＺｈｉｙｏｎｇ，ＸｉａｎｇＬｉ （１ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００， Ｃｈｉｎａ；２ＢｅｉｊｉｎｇＱｉａｎｊｕｎｆａｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＦｕｎｇａｌＳｃｉｅｎｃｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００００５，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｗｉｔｈａｂｕｎｄａｎｔｆｕｎｇｉｓｐｅｃｉｅｓａｎｄｒｉｃｈｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ａｇａｒｉｃａｌｅｓｃｏｍｐｒｉｓｅｓａｖａｒｉｅｔｙｏｆｍｅｄｉｃｉｎａｌ，ｅｄｉｂｌｅａｎｄ ｐｏｉｓｏｎｏｕｓｆｕｎｇｉＴｏｉｄｅｎｔｉｆｙｔｈｅｓｅｆｕｎｇｉｈａｖｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｆｏｒｔｈｅｄｉｓｃｏｖｅｒｙｏｆｎｅｗｍｅｄｉｃｉｎａｌｅｄｉｂｌｅｆｕｎｇｉｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，ａｎｄ ｔｈｅｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎｏｆｍｙｃｏｔｏｘｉｎｈａｚａｒｄＭｅｔｈｏｄｓ：Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，５０ｓｐｅｃｉｅｓｂｅｌｏｎｇｔｏ２３ｇｅｎｕｓｏｆ１３ｆａｍｉｌｉｅｓｉｎＡｇａｒｉｃａｌｅｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉ ｆｉｅｄｂｙＤＮＡｂａｒｃｏｄｅＴｈｅｉｎｔｅｒｎａｌｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄｓｐａｃｅｒ（ＩＴＳ）ｗｅｒｅａｍｐｌｉｆｉｅｄａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅｄＳｅｑｕｅｎｃｅｌｅｎｇｔｈｓ，ｂａｓｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ，ａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅｓｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｕｓｉｎｇＢＬＡＳＴＡｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｎｅｉｇｈｂｏｒｊｏｉｎｉｎｇ（ＮＪ）ｔｒｅｅｗａｓａｌｓｏｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ ｆｏｒｔｈｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｂｏｖｅｍｅｎｔｉｏｎｅｄｓｐｅｃｉｅｓＲｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅＩＴＳｓｅｑｕｅｎｃｅｌｅｎｇｔｈｓｏｆ５０ｆｕｎｇｉｓｐｅｃｉｅｓ ｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ４６３ｔｏ７５１ｂｐａｎｄｔｈｅＧＣｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｂｅｔ