在MabSelectSuReLX的反复在位清洗.PDFVIP

GE Healthcare Life Sciences 应用文献 28-9872-96 AA 亲和层析 在 MabSelect SuRe™ LX 的反复在位清洗 期间的寿命性能研究 本文评估了一种用于捕获单克隆抗体的碱 Protein A 亲和层析在上样前也需要最低限 稳定性的、Protein A 来源的亲和层析介质 度的调节层析条件 ，幵允许快速工艺转化到 （树脂）MabSelect SuRe LX 经过包括 0.1 M 稳定的工艺中间步骤。 氢氧化钠在位清洗的 100 个纯化循环后的 基于 protein A 配体的 MabSelect™家族的亲 性能。结果显示，它的动态结合载量可以保 和层析层析介质 已经被生物制药单克隆抗 持，而且在整个研究中产量不变。配体密度 体的大规模商业化厂商所广泛接受。这种层 也保持不变。此外，脱落的 protein A 和宿 析介质 已经被扩展以满足大规模生产的发 主细胞蛋白的水平几乎保持不变。利用更高 展需要。MabSelect™家族最近的一个新成员 浓度氢氧化钠的扩展实验证实了其良好的 是 MabSelect SuRe LX，它是与 MabSelect 稳定性。这些数据表明，MabSelect SuRe LX SuRe 具有相同硬度的高流速琼脂糖基质和 可以在生产规模的纯化中被反复使用，幵在 碱稳定性配体。这种配体能够耐受利用 0.1 长期的工作寿命中提供满足预定质量和安 或 0.5 M 氢氧化钠（NaOH）的苛刻 CIP 和 全标准的产品。 消毒程序。然而，与 MabSelect SuRe 相比， MabSelect SuRe LX 在稍长的停留时间（例 介绍 如 6 到 10分钟）下提供 20%到 50%的更高 的动态结合载量。 对于单克隆抗体（MAbs）作为生物药物的 需求日益增加已经促进了具有非常高表达 本 应 用 文 献 介 绍 了 一 项 研 究 ， 以 定 量 水平的细胞培养的发展。在过去的 20 年来， MabSelect SuRe LX 在使用 0.1 或 0.5 M 哺乳动物细胞培养的抗体表达量 已经急剧 NaOH 在位清洗（CIP）的反复纯化循环中长 上升。今天我们通常可以看到 5 到 10 g/l 期的层析性能。测定的参数包括动态结合载 的表达量 ，而且已经有高至 15 g/l 或更高的 量 、抗体产量和脱落的 protein A 和宿主细 表达水平的报道。对于能够应付这种提高的 胞蛋白（HCP）的水平。 纯化工艺的需求也已经相应地升高。 材料与方法 单克隆抗体的大规模纯化通常由两个或三 利用含有单克隆抗体原料和 0.1 M 个层析步骤组成，而 protein