猪UCP5 基因克隆表达特性及与屠体性状的关联分析 - 生物化学与生物.PDF

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2010, 37(12): 1323~ 1330 UCP5 基因克隆表达特性及 与屠体性状的关联分析* 1, 4) 1)** 2) 3) 1) 1) 1) 1) 李红霞 赵兴波 徐宁迎 姜运良 曹 梦 刘玉方 方 迟 李宁 (1) 国农业大学农业部动物遗传育种与繁殖重点开放实验室，农业生物技术国家重点实验室，北京 100 193； 2) 3) 4) 浙江大学动物科学学院，杭州3 10029 ； 山东农业大学动物科技学院，泰安271018； 大连医科大学比较医学教研室，大连116000) 摘要 通过3 和5 cDNA 末端快速扩增(RACE)获得了猪UCP5 基因全长cDNA 序列，通过不同品种猪UCP5 基因编码区和 调控区单核苷酸多态分析，发现 1 567 bp 处存在A T 的突变，从而导致转录因 CdxA 、HNF-1、Sox-5、GATA-2 结合位 - 点发生了改变 在金华 皮特兰F2 代资源群中，使用PCR 限制性片段长度多态性(RFLP)方法，对524 头个体进行基因型测 伊 定，并与屠体性状关联分析，结果发现，AA 型活体重极显著高于BB 型(P 0.01)，AB 型活体重显著高于BB 型(0.0 1 P 0.05)，AA 型的后腿肌肉重极显著高于BB 型(P 0.01)，AA 型的后腿脂肪重显著高于BB 型(0.01 P 0.05) 同时，通过实 时荧光定量PCR 获得了UCP5 基因在初生仔猪心、肝、脾、肺、肾、眼肌、腹脂和大脑等不同组织中基因表达的特性，结 果表明，UCP5 在猪的各种组织均有表达，在脑和肺 表达量最多 检验发现，初生达兰猪眼肌 UCP5 的表达量显著高于 t 金华猪 关键词 猪，UCP5 ，克隆，表达特性，屠体性状，关联分析 学科分类号 S82 DOI: 10.3724/SP.J.1206.20 10.00324 解 联蛋白(uncoupling protein，UCP) 是位于 末端快速扩增(RACE)法获得完整的猪UCP5 基因 线粒体内膜的阴离 转运家族成员，在调节能量分 cDNA 序列，并对其氨基酸组成等结构特点进行预 配中发挥着重要的作用，目前在哺乳动物共发现了 测 通过构建金华猪、莱芜猪、达兰猪和杜洛克猪 UCP1 、UCP2 、UCP3 、UCP4 和UCP5 五个成员 基因组池，对UCP5 基因的各个外显 和5 及3 UCP1 是最早发现的解 联蛋白家族成员，在褐色 调控区进行克隆测序，以确定存在的单核苷酸多态 脂肪组织(brown adipose tissue ，BAT) 特异表达， 位点，此后通过引入错配碱基创造酶切位点，利用 具有解离氧化磷酸化 联、减少ATP 生成、产生 PCR 限制性片段长度多态性(RFLP)方法，研究探 [1] 热量以维持体温的重要作用 UCP2 广泛存在于 讨猪UCP5 基因与屠体性状的关系 通过实时荧光 动物脑、骨骼肌、白色脂肪等组织 [2] UCP3 在 定量PCR 研究UCP5 基因在金华猪和达兰猪的心、 骨骼肌、脂肪及心肌 均有表达，尤其在骨骼肌 肝、脾、肺、肾、眼肌、腹脂