坛紫菜藻胆蛋白粉的研制.pdfVIP

坛紫菜藻胆蛋白粉的研制1 桑卫国，章宗铭，虞超群 宁波大学生命科学与生物工程学院，浙江宁波 （315211 ） E-mail ：sangweiguo@ 摘 要：选用坛紫菜为原料，采用净化、破碎、提取、分离、浓缩、干燥等工艺，研制了坛 紫菜色素蛋白粉；通过对溶胀法、超声波破碎、酶解法等细胞破碎的方法的比较，并运同多 级梯度硫酸铵盐析，膜过滤等工艺，探讨了适合大规模制备藻胆蛋白的途径。 关键词：坛紫菜；藻胆蛋白；分离；纯化 紫菜内含有特殊的色素蛋白———藻胆蛋白(phycobiliproteins,PBP)，这是一类存在于红 藻、蓝绿藻和隐藻中的重要光合色素蛋白复合物，它能把捕获的光能高效传递给叶绿素，从 而使海藻的光合作用得以发生。藻胆蛋白在藻类中的含量可达细胞干重的25%-28%,它包括 藻红蛋白(phycoerythrin, PE)、藻蓝蛋白(phycocyanin, PC)、别藻蓝蛋白（allo-phycocyanin, APC) [1,2] 。藻胆蛋白是一种非常重要的光动力药物的原料， 和藻红蓝蛋白（phycoery-throcyanin ） 特有的光敏效应可辅助激光治癌，在病灶部位富集，吸收光后高效产生自由基和活泼态氧， 从而实现对肿瘤细胞的杀伤。有光毒性而没有暗毒性，在人体内代谢快,藻胆蛋白还具有抗 氧化清除自由基和提高免疫力的功效。其制作的免疫荧光标记抗体，检测灵敏度远远高于传 统的荧光标记物，可用于特殊分子定位和重要分子检测，包括SARS病毒的免疫分子检测， 能准确地诊断肿瘤、确定病变部位和病情轻重程度等。藻胆蛋白可作为功能因子用于保健食 品和功能食品及特殊饲料，同时还是理想的天然色素，可大量用于食品工业和化妆品工业等， 无毒副作用，是安全的添加剂[3] 。此外，最新研究发现它在光学信息存储与处理、快速光电 探测、人工神经网络等方面也具有潜在的应用前景[4] 。但由于藻胆蛋白分离纯化的困难，现 有的藻胆蛋白商品价格昂贵，使它的应用受到了一定的限制。尽管有不少人试图将藻胆蛋白 基因转入微生物中以实现藻胆蛋白的大规模生产，但用转基因方法生产藻胆蛋白还有很长的 一段路要走，目前从海藻中提取分离藻胆蛋白仍是获得藻胆蛋白的主要途径。 我国对藻类开发利用的力度和深度还很小，大部分仅限于简单的食用，出口产品也只限 于初制品，还未应用高科技进行深层次的加工和利用。而藻类的一些高科技深加工产品则主 要依靠进口，作为药物使用价格十分昂贵。目前藻红蛋白的生产基本由美国Sigma公司垄断， 国内有以红毛菜、紫球藻和螺旋藻作为原料提取藻红蛋白的报导，目前仍处于研究阶段，未 有成品进入市场销售。我国海域宽广，藻类资源十分丰富，是世界上最大的紫菜生产大国， 我国紫菜养殖和加工又主要集中在苏、浙、闽沿海， 其产量占全国的95% 以上。江苏省如 东县条斑紫菜生产量占全国总量的50%.紫菜的市场价格是红毛菜的1/10，小球藻和螺旋藻的 1/3。选用紫菜提取藻胆蛋白，具有成本低，得率高的优点。紫菜中的藻胆蛋白其大部分主 要是藻红蛋白(PE) 。由于已报道的藻胆蛋白分离纯化方法复杂，导致生产成本太高无法大 量制备以满足潜在的市场需求，本研究的目的就是探讨一种简单有效的适合大量制备的分离 纯化藻胆蛋白的方法。 1本课题得到农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室(KFT2006-2)得资助。 - 1 - 1 材料与方法 1.1 原料 坛紫菜产自浙江省象山港海区。 1.2 试剂 磷酸二氢钾 分析纯 上海试剂厂 氢氧化钠 分析纯 上海试剂厂 硫酸铵 分析纯 上海试剂厂（均为 AR 级） 1.3 仪器 UV-2102 C 型紫外分光光度计 上海精密科学仪器有限公司制造 DHG －9070AS 新型电热恒温鼓风干燥箱