小麦体细胞胚发生中DNA、RNA 和蛋白质的合成动态 - 核农学报.PDF

( ) 核 农 学 报 　1997 ,11 4 :209～2 14 209 　 A cta A g ricult u rae N ucleatae S i nica 小麦体细胞胚发生中DNA 、RNA 和蛋白质的合成动态 崔凯荣 (华中理工大学药物研究所 　武昌　430074) 王晓哲 　陈　雄 　王亚馥 (兰州大学干旱农业生态国家重点实验室 　兰洲 　730000) 用普通小麦的幼胚在 N B M S Ⅰ培养基上诱导出胚性和非胚性愈伤组织 ,将这 6 5 两种愈伤组织分别转至 N B M S Ⅱ培养基后 ,胚性愈伤组织形成许多体细胞胚 ,非胚 6 5 性愈伤组织形成不定苗 。胚性愈伤组织转入 N B M S Ⅱ培养基后 ,第 2 ～4d 形成胚 6 5 性细胞 ,二细胞 、四细胞原胚 ,8d 后 ,则以多细胞原胚为主 ,12～24d 后 ,可见球形胚和 梨形胚 ,26d 后则多为成熟胚 。利用放射性同位素液体闪烁计数技术结合核酸 、蛋白 ( ) 质合成抑制剂 ,研究了以小麦 T rit icu m aes t iv u m L . 幼胚为外植体诱导产生体细胞 胚的发生 、发育过程中 DNA 、RNA 和蛋白质的合成动态 。发现 RNA 、蛋白质的合成 分别在胚性愈伤组织培养后的第 4 和第 8d 就达到高峰 ,DNA 的合成也明显增加 ,但 变化平缓 。而非胚性愈伤组织中的核酸和蛋白质的合成速率远远低于胚性愈伤组 织 。加入抑制剂后 ,不仅抑制了核酸 、蛋白质的合成 , 同时也抑制了胚性愈伤组织的 生长和体细胞胚的发生 、发育 ,加入时间越早 ,抑制效应越明显 。可见 ,DNA 、RNA 和蛋白质是体细胞胚发生 、发育的分子基础 。 关键词 :小麦 　体细胞胚胎发生 　DNA 　RNA 　蛋白质合成 前 　　　言 禾谷类作物离体培养通过体细胞胚发生途径形成再生植株的报道较多[ 1 - 3 ] 。过去对小 麦幼穗和幼胚培养的胚性无性系建立[4 ] 、体细胞胚发生的细胞学及淀粉消长动态[5 ] 、蛋白质 组分和过氧化酶同工酶的变化[6 ] 以及超微结构等[7 ] 进行了较为系统的研究 。在此基础上 ,本 文用放射性同位素液体闪烁计数技术 ,结合核酸 、蛋白质合成抑制剂 ,研究了小麦体细胞胚发 生中DNA 、RNA 和蛋白质的合成动态及相应的抑制剂对这一发育途径的影响 。 材 料 与 方 法 ( ) 小麦体细胞胚发生的诱导 　以普通小麦 T rit icu m aes t iv u m L . 栽培品种陇春 13 号授粉 此文于 1996 年 8 月 4 日收到 。 国家自然科学基金资助项 目。 2 10 核 　农 　学 　报 11 卷 后 5～7d 的幼胚为外植体 ,接种于附加有 2 ,4D 3mg/ L 、KT 05mg/ L 、甘氨酸 2mg/ L 、L H ( 300mg/ L 、蔗糖 3 % 、p H58 的 N B M S Ⅱ培养基 N 大量元素 + B