1 初步探究影响尿生成因素与肾缺血再灌注损伤机制.docVIP

初步探究影响尿生成因素及肾缺血再灌注的损伤机制 尚晓东1，韩忠宇，许晖阳1，卢沛根1，殷杰1， 苏达1 (1.南方医科大学第二临床医学院临床医学五年制) 指导老师：曾嵘2 (2.南方医科大学基础医学实验教学中心，广州 510515) 摘要：目的：加深理解尿生成的机理，初步探究缺血再灌注机制。 方法：分别观察正常情况下、IV.NS、IV.20%NS动脉血压，尿量和尿肌酐含量；复制肾缺血再灌注（I-R）模型，观测动脉血压、尿量和尿肌酐含量。结果：肾缺血再灌注后血肌酐浓度增高，尿肌酐浓度降低，内生肌酐清除率（Ccr）明显降低。结论：肾I-R导致肾小球滤过能力下降，内生肌酐清除率下降。 Abstract: Objectives: To deepen the understanding of the mechanism of urine generated and explore the mechanism of ischemia-reperfusion .Methods: Under normal conditions, IV.NS, IV.20% NS arterial blood pressure, urine output and urine creatinine concentration; copy renal ischemia-reperfusion (IR) model, observing arterial blood pressure，urine and urine creatinine concentration. Results: Serum creatinine concentration increased in the renal ischemia-reperfusion, while the urine creatinine concentration decreased, Ccr was significantly reduced. Conclusion: I-R leads to kidney glomerular filtration capacity and the Ccr’s decreasing. 关键词：肾缺血再灌注 尿量 肌酐 肾是机体主要排泄器官，内生肌酐清除率在一定程度上反映了肾脏排泄能力。尿生成主要包括肾小球滤过，肾小管和集合管的重吸收以及肾小管和集合管的分泌三个基本过程。肾缺血再灌注(ischemia - reperfusion , I - R) 损伤是临床上常见的病理过程,为急性肾功能衰竭的重要发病环节。因此探究理解肾I-R损伤机制对于临床有很大指导意义。本文旨在通过复制I-R损伤模型，尿生成和肌酐清除率来探究肾I-R对于尿生成的影响。 材料与方法 1.1材料 1.1.1主要试剂与仪器：20%乌拉坦；0.2%肝素生理盐水；5%葡萄糖生理盐水； 20%葡萄糖；速尿； PcLab生物医学信号采集处理系统；压力换能器；手术器械；动、静脉导管， 输尿管导管；恒温水浴箱分光光度仪，均由南方医科大学基础医学实验教学中心提供。 1.1.2肌酐测定试剂：试剂三，试剂四，10μmol/L Cr标准品，由南方医科大学基础医学实验教学中心提供 1.1.3实验动物：家兔，体重2.5kg，由南方医科大学实验动物中心提供 1.2 探究影响尿生成的因素 ADDIN NE.Ref.{985B39DD-0E36-47B5-A034-FAE336BAA0D0}[1] 20%乌拉坦5ml/kg耳缘静脉注射麻醉，分离右侧颈总静脉插管，补充5%葡萄糖生理盐 水30ml；分离左侧颈动脉插管监测血压； 腹正中线剪开腹腔，行左侧输尿管插管术，用刻度试管收集并记录尿量。取尿0.5ml测量尿肌酐浓度。 1.3 家兔肾I-R模型复制 ADDIN NE.Ref.{B100F723-6218-49F4-9C9E-BE5DAE008A23}[1] 游离左侧肾动脉，用动脉夹夹闭20min，观察记录夹闭后动脉血压及尿量变化。松开动脉夹，记录15min尿量。对实验室不同实验组模型分别静脉输入NS 50ml、NS49ml+速尿1ml、NS40ml+20%GS 10 ml。观察15分钟记录尿量。 1.4 尿肌酐测定方法 1.4.1 取样稀释：取尿液10ul与2ml蒸馏水按1:200比例稀释 1.4.2 加样配液: 表1. 分光光度法测定尿液OD值各管加样方法 加样（ml） 标准管 测定管 空白管 测试样品上清 0 1.6 0 试剂一(Cr标准品) 1.6 0 0 蒸馏水 1.6 试剂三 0.5 0.5 0.5 试剂四 0.5 0.5 0.5 测定：37℃ 计算：肌