组织培养所需实验条件与器具.doc

组织培养所需的实验条件和器具 图片怎样才能发上来？请帮助！ 一、植物组织培养全过程： 二、植物组织培养常用的设备和器材 1、培养室: 包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间，是组织培养实验所必须具备的基本条件。 2、仪器设备：主要有超净工作台、冰箱、水浴锅、高压蒸汽灭菌锅、烘箱等。 超净工作台 高压蒸汽灭菌锅 水浴锅 3.实验常用用具 培 养 容 器 试管 用于茎尖、花药、幼胚培养。一般要求试管口径要大，长度稍短，便于操作，以20mm*150mm、25mm*150mm、0mm*200mm为宜。 三角瓶 是植物组织培养中最常用的培养容器，适于各种培养。接种外植体时多用容积为50毫升的三角瓶，一般实验用100毫升的三角瓶，生产育苗多用150毫升的三角瓶，液体振荡培养用300毫升以上的大三角瓶。优点是瓶口小，瓶底大，培养面积大，受光好，易放置，不易失水，培养效果好。缺点是价格较贵，易破损。 果酱瓶或 罐头瓶 用于组培苗的大量繁殖，生产中应用较多的是200~300毫升的果酱瓶或罐头瓶。优点是成本低，瓶口大，操作方便，透光好，空间大，培养材料生长健壮。但培养基容易失水，污染率较高。 培养皿 用于无菌材料分离、无菌发芽、单细胞固体平板培养、胚和花药培养、滤纸灭菌等。常用的规格有60mm、90mm和120mm。 兰花瓶 主要用于蝴蝶兰、大花蕙兰等兰科花卉组培苗的继代培养。 塑料容器 优点：重量轻，运输方便，清洗过程中不会损耗；缺点：不易清洗，透光不好，壁上会有水珠，植物生长效果不是很好，用久了会变毛，价格贵。 封口材料 为防止培养基干燥和污染杂菌，培养容器瓶口需要一定的封口材料包扎。可用牛皮纸、硫酸纸、耐高温聚丙烯塑料，用线绳或耐高温橡皮筋捆扎，或用塑料瓶盖。 玻 璃 器 皿 试剂瓶 用于各种试剂、母液的存放，有广口和细口之分，有白色和棕色之分。见光易分解的药品用棕色瓶保存。 烧杯 用于配置各种母液和培养基。 量筒 配制各种溶液及培养基是测量用。 容量瓶 用于配制各种溶液时定容用。 移液管 （吸管） 用于吸取各种母液和植物生长调节剂，有条件的可用微量可调移液器。 接 种 器 械 镊子 有直镊和枪镊之分，接种和转移材料常用枪镊，枪镊腰部弯曲，使用省力，枪镊规格有16cm、20cm、23cm、26cm、30cm。 剪刀 有直剪和弯剪之分，用于剪取植物材料、茎段，进行继代培养的转接。 解剖刀 用于切割植物材料。 其他工具 包括接种针、接种铲等，用来接种花药或转移植物组织。 三、常用药品 组织培养所需药品主要用于培养基的配制，也有部分用于消毒，主要有以下几类： 类别 药品 作用 消毒药品 次氯酸钠、次氯酸钙、双氧水、漂白精片、溴水、硝酸银等。 消毒 无机盐类 KNO3、MgSO4·7H2O、NH4NO3、KH2PO4、CaCl2·2H2O、Fe2（SO4）3、Na2HPO4、CuSO4、NaNO3、Na2SO4、ZnSO4、MnSO4·4H2O、MnCl2·2H20、KI、H3BO3 等。 无机盐是供外植体吸收的基本营养成分，各有不同作用，如N、P 影响蛋白质的合成，Ca、K、S、Mg 影响酶活性等。 有机化合物 蔗糖、维生素类、肌醇、氨基酸等。 其中蔗糖是不可缺少的碳源，也是渗透压调节物质。维生素的主要作用是促进细胞分裂和诱导器官分化。氨基酸是蛋白质组成成分，也是有机氮源。 植物 生长 调节 剂 生长素类 吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、2，4－D 和吲哚丁酸（IBA）。 2，4－D 有利愈伤组织生长，NAA、IAA、IBA 有利于器官分化。 细胞分裂素类 激动素（KT）、6－苄基腺嘌呤（BA）、玉米素（ZT）等。 其作用是促进细胞分裂与分化，其中KT 能明显促进芽的分化而抑制根的形成。 赤霉素类 以GA3 运用最广泛 有促进不定芽和幼株伸长的作用。 有机附加物 人工合成和天然的有机物，常用的有酵母提取物、椰乳、果汁等及相应的植物组织浸出液。 对细胞和组织的增殖和分化有一定促进作用。此外琼脂在组培中作为凝固剂，是外植体的支持体，常用浓度为0.5－1％。 水 培养基用水原则上使用蒸馏水，去离子水等。 四、实验条件 1、光照 光照是组织培养中的重要外界条件之一，它对外植体生长和分化有很大的影响。光照对组织培养的影响主要表现在光周期、光照强度（光强）和光质这三个方面。2、温度 温度最重要的作用是决定呼吸的速度和控制植物组织代谢过程的化学反应。在植物组织培养中，不同植物繁殖的最适温度不同，大约为23～28℃之间，但也有不少例外，差异比较大。通常低于15℃时，培养的外植体组织生长缓慢或出现停滞，但高于35℃对生长也不利。在实际工作