偶氮类色素胭脂红对泥鳅组织酯酶同工酶表达的影响.PDF

第30卷第8期 水产 科 学 V01．30NO．8 Z011年8月 FISHERIESSCIENCE Aug．20iI 偶氮类色素胭脂红对泥鳅组织酯酶同工酶表达的影响 于淑池，张翼，朱叶莲 (湖州师范学院生命科学学院，浙江湖州313000) 摘 要：采用肌肉注射法进行染毒，运用聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究胭脂红在不同注射剂量、不同染毒 时间对泥鳅肝脏、心脏、脾脏、肌肉酯酶同工酶表达的影响。试验结果表明，经一定剂量的胭脂红注射 后，泥鳅酯酶同工酶在脾脏中表达最强，肝脏和心脏次之，肌肉最弱，其中脾脏的表达随时问、浓度呈减 弱趋势，其余组织则呈先增强再减弱最后增强的趋势。 关键词：胭脂红；泥鳅；酯酶同工酶；聚丙烯酰胺凝胶电泳 中图分类号：$966．4 文献标识码：A 文章编号：1003—11ll(2011)08—0509—04 胭脂红(Ponceau4R)，又称丽春红4R，是一种验室曝气48 h的自来水水槽内驯养一周。驯养期 单偶氮类水溶性人工合成色素，其成本低廉、色泽 间，每日换水1次。试验期间水温23-～25℃。 鲜艳、着色力强、配色方便，广泛应用于医疗、食品、 胭脂红(C88 化妆品和饲料中[1]。有报道指出，胭脂红与欧盟标 集团化学试剂有限公司。 准禁用的苏丹红I同属偶氮类色素，在体内可代谢 1．2方法 生成致突变原前体一芳香胺类化合物，DNA和 1．2．1染毒 RNA结合形成加合物而诱发突变[2]，近年来，毒理 选取身体健康、体表无破损、规格一致的泥鳅 学试验显示胭脂红具有一定的致癌和致突变作 40尾，随机分成4组，每组10尾。其中一组为对照 用[3]。可促进果蝇体内脂质过氧化反应，破坏果蝇 组，其他3组按0．05、0．2、0．8mg／ml，4：1(m／V) 抗氧化系统的平衡n]，对小鼠心、肝等器官有一定 注射，对照组注射相应量生理盐水，各组连续培养 anguillica—观察。 的毒性[5]。胭脂红对泥鳅(Misgurnus datus)的红细胞具有一定的致突变作用[6]，但对同1．2．2采样 工酶表达的影响尚未见报道。同工酶技术可指示 染毒后连续培养4d，每日于对照组与染毒组 一些具有特异性的同工酶带，定性地反映环境中的 中取一尾泥鳅，提取肝脏和肌肉组织；连续培养5 污染物[7]。酯酶同工酶能水解大量非生理存在的 d，每日对泥鳅心脏和脾脏取样。 酯类化合物，包括某些药物，具有解毒作用。多种 泥鳅处死后，迅速提取肝脏、心脏、脾脏、肌肉 动植物在环境毒物存在的情况下，酯酶同工酶的表 组织于冰上，用预冷的生理盐水清洗血污，转入研 达会有显著的变化[8]。泥鳅的敏感性高，近年来常 7．0的磷酸缓冲液置冰上迅 钵中以1：10加入pH 用来检测水体的污染情况及评价污染物对水生生 速研磨，取研磨匀浆。1200r／min冷冻离心20min， 物的遗传损害及毒理效应[9]。 提取上清液一20℃冷冻保存备用。 本试验采用肌肉注射的方法，研究注射不同剂 1．2．3 同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳 量的胭脂红不同染毒时间对泥鳅肝脏、心脏、脾脏、 采用参考文献[10]的方法制备凝胶，浓缩胶浓 肌肉酯酶同工酶表达的影响，以探讨胭脂红对泥鳅 度为3％，分离胶浓度为7．4％，Tris—Gly电极缓 遗传毒性和致突变性效应。 冲液pH=8．3。每个样品10弘l点样。连接直流稳