狂犬病诊断技术 - LinkTADs.PDFVIP

狂犬病诊断技术 涂长春 博士 Email: changchun_tu@ 军事医学科学院军事兽医研究所 中国农科院长春兽医研究所 世界动物卫生组织（OIE）狂犬病参考实验室 目前狂犬病的诊断措施 一、临床诊断： 根据临床症状 流行病学 只能参考，不能用于确诊 二、实验室诊断： 病原与血清学检测技术 用于确诊 用于狂犬病检测的样品 一、病毒检测 脑组织：人和动物 唾液：人和动物 脑脊液：病人 皮肤活检：病人 二、抗体检测： 血清：人和动物 目前狂犬病诊断现状 • 现状：人主要靠临床诊断，动物主要靠实 验室诊断 • 标准：实验室诊断是国际上确认狂犬病的 唯一依据 • 结论：能否开展实验室检测是国际上判定 一个国家狂犬病防治水平的重要指标，是 狂犬病防治最基本的技术能力。 狂犬病实验室检测技术 三位一体检测技术 实验室诊断全覆盖 1 病毒抗原检测 狂犬病实验室 2 病毒核酸检测 诊断 3 血清学检测 狂犬病实验室检测技术国际标准 一、采样技术 吸管法（脑组织） 二、病原检测（抗原与核酸） 免疫荧光抗体检测（ Fluorescent antibody test ，FAT ） 快速免疫诊断法（ Rapid immunodiagnostic test ，RIDT) ：免疫酶技术 ，免疫组化法（dRIT)。只需普通光镜，不需荧光显微镜。 组织学检测：Negri bodies. 已淘汰。 核酸检测：RT-PCR ，荧光定量PCR ，基因探针或芯片等； 单抗测定、序列测定与系统发生分析 三、病毒分离 WHO标准 OIE标准 细胞培养（RTCIT ） 小鼠接种试验（MIT ） 四、血清学检测 荧光抗体中和实验（FAVN ） 快速荧光灶抑制试验（RFFIT) ELISA ：各种抗体检测试剂盒 脑组织样品的采集 吸管采集法——WHO 、OIE共同推荐 • 适合大规模的流行病学调查； • 适于野外采样； • 操作简单,不容易引起气溶胶。 • 污染面积小； • 涉及到的实验器材少 。 取直径0.5mm吸管，沿枕骨大孔向一只眼的方向插入，边插边轻轻旋转至不能深 入为止，捏紧吸管后端并拔出，管里即含有脑组织样品（包括脑干、小脑、海马 角和皮质）。 脑组织样品的采集 把死亡犬颈部往前弯曲，切开枕部和第一颈椎间的皮肤、韧带和肌肉。 暴露枕骨大孔 插入吸管 脑组织样品的采集 将吸管内脑组织移入样品管 脑组织样品的采集 样品的包装 吸收性材料 主容器 次级