发根农杆菌转化海边香豌豆及转化体的体细胞胚胎发生.pdfVIP

应用与环境生物学拙 2002．s(2)：l90—194 c^ J^ En~onB l=ISSN 1006—687X 发根农杆菌转化海边香豌豆及 转化体的体细胞胚胎发生 王江波 贾敬芬 西北大学生物技术省重点实驻室 西安 710069) 摘 要 将海边香豌豆无菌苗的子叶和下胚轴切段在附加P(2，4-D)=1mgL一，R(6BA)=05mgL 的Ms培养基 t预培养 3d，然后与发根农杆菌A4菌液共培养30rain洗涤之后．在附加羧苄青霉素的无激素的MS培养基上培养．7 ～ 10d后 ．外植体切面处长出许多毛状根．继代培养时生长旺盛，且产生许多侧根和分枝．毛状根的诱导频率与无菌苗 培养天数和外植体来源部位有关 子叶切块的诱导率明显高于下胚轴．16d龄无菌苗的子叶切块诱导毛状根的频率撮 高 乙酰丁香酮处理菌液可 有效提高子叶外植体的毛状根诱导频率．将毛状根切段培养在含有p(2．4-D)=1．0mg L 的MS培养基上可诱导出愈伤组织 该种愈伤组织转移到含有p(2，4-D)