雷射烧结组织支架制作与水胶结合体外软骨细胞评价.PDF

雷射燒結組織支架製作與水膠結合體外軟骨細胞評估 研究摘要 軟骨是一種結締組織，由於沒有血管和神經之分布，養分輸送及廢物排出均須藉由細胞外間質以擴散作用完成，因此軟骨細胞再生與修復速度較 慢；例如關節軟骨損傷後由於自我修復能 力差，通常須仰賴軟骨修復手術填補或人工關節置換，才能避免惡化為退化性關節炎等後遺症。而軟骨修復常用之方法包括組織修復法、組織移植法、細胞植入法等，由於這些方法都需要有 足夠之自體或異體軟骨植入物方能完成，然而軟骨植入物因不易取得，且植入後常有免疫排斥問題，因此利用組織工程技術，製作生物可降解植 入物支架，透過體外細胞增殖實驗生成活體軟 骨植入物，已成為現今再生醫學領域研究之主要課題。另外利用組織工程技術培養軟骨植入物需先建構多孔性支架，而目前支架製作大多採用模 具成型法(如鹽析法、氣體發泡法、膜積層法等) ， 無法完全掌控支架內孔洞結構(大小、密度)及孔洞間連結性，影響活體軟骨組織生成品質及植入後軟骨再生能力。近年來，文獻指出利用高分子水膠包覆細胞已成為『非支架』方式，成功 進行 軟骨組織缺損修補之方法。然而含透明質酸及明膠之高分子水膠是一種立體網狀結構具親水性，且高含水率溫度感應液 固相變化材料，可包覆活體細胞、提供細胞體外增生環境、促進軟骨細/ 胞增生與避免軟骨去分化，並產生修補組織缺陷之植入物，但缺乏結構支撐強度，無法適用於承受力量之軟骨缺損修補，造成臨床應用受限。另外，關節軟骨具有軟硬骨雙相複合結構，因此/ 在組織工程應用於人體關節軟骨修復時，必須要能製作生物相容且具有軟硬骨雙相複合組織支架，並具有細胞增殖功能方能供臨床應用。爰此，本研究為了克服上述軟骨活體組織生成所面臨/ 之問題，分別進行雷射燒結軟硬骨雙相複合組織支架製作、高分子水膠灌注立體孔洞支架實驗，利用含水膠支架製作兼具結構支撐強度及細胞增生活性之之軟骨組織植入物；/ 令外為了驗證體 外細胞培養實驗成效及臨床應用可行性，本研究也進行了細胞貼附、增生等實驗和客製化耳朵軟骨活體細胞培養實驗流程規劃及耳朵外型支架模 具製作評估等先期研究。 多層次複合支架設 體外細胞培養 體外細胞培養前置實驗 雷射燒結組織支架製作與水膠結 計製作 合體外軟骨細胞評估 前置實驗 與支架體外實驗 複合支架設計 軟骨細胞培養 在多層次支架製做高分子水膠灌注支架實驗方面也證實了相較於三種實驗設計，重力 複合支架製作 第一部分 第二部分 支架貼附率測定 垂降法(gravitational dropping)能再一小時內完全均勻的融入支架，而後結合高分子水膠後進