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醋酸纤维素薄膜作用电泳的支持物有何优缺点？ [标签： HYPERLINK /wiki/k-%BB%F9%B4%A1%D6%AA%CA%B6_n-y.html \o 基础知识 基础知识] 提问者： 游客 浏览次数：246 提问时间：2008-09-07 01:38 姓名： HYPERLINK /user/answer.html HYPERLINK /doc/view-d2449972.html \l # \t _self ? 笔名： HYPERLINK /user/answer.html \o 等级： 回答数： 0 次 通过率： 0 主营行业： 公司： 答案 HYPERLINK javascript:void(0) \t _self 收藏答案 HYPERLINK javascript:void(0) \t _self 收藏答案 HYPERLINK javascript:void(0) \t _self 分享给好友 最新回答者： HYPERLINK /user/mayibanjia110/answer.html \o mayibanjia110 mayibanjia110 等级： 列兵 (一级) 回答的其他贡献者： HYPERLINK /user/mayibanjia110/answer.html \o mayibanjia110 mayibanj… HYPERLINK /doc/history/list.html?did=2449972 　　醋酸 HYPERLINK /selloffer/k-%CF%CB%CE%AC%CB%D8_n-y.html \t _blank 纤维素薄膜电泳的特点： 　　醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体。 　　它有以下优点： 　　①电泳后区带界限清晰； 　　②通电时间较短（二十分钟至一小时）； 　　③它对各种蛋白质（包括血清白蛋白，溶菌酶及核糖核酸酶）都几乎完全不吸附，因此无拖尾现象； 　　④对染料也没有吸附，因此不结合的染料能完全洗掉，无样品处几乎完全无色。它的电渗作用虽高但很均一，不影响样品的分离效果，由于醋酸纤维素薄膜吸水量较低，因此必需在密闭的容器中进行电泳，并 HYPERLINK /wiki/k-%CA%B9%D3%C3_n-y.html \t _blank 使用较低有电流避免蒸发。 　　醋酸纤维素薄膜电泳已经广泛用于血清蛋白，血红蛋白，球蛋白，脂蛋白，糖蛋 白，甲胎蛋白，类固醇及同工酶等的分离分析中，尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低，但它具有简单，快速等优点。根据样品理化性质，从提高电泳速度和分辨力出发选择缓冲液的种类，pH和离子强度。选择好的缓冲液最好是挥发性强，对显色或紫外光等观察区带没有影响，若样品含盐量较高时，宜采用含盐缓冲液。例如血清蛋白电泳可选用pH8.6的巴比妥缓冲液或硼酸缓冲液； HYPERLINK /selloffer/k-%B0%B1%BB%F9%CB%E1_n-y.html \t _blank 氨基酸的分离则可选用pH7.2的磷酸盐缓冲液等。电泳时先将滤膜剪成一定长度和宽度的纸条。在欲点样的位置用铅笔做上记号，点上样品，在一定的电压，电流下电泳一定时间，取下滤膜，进行染色。不同物质需采用不同的显色方法，如核苷酸等物质可在紫外分析灯下观察定位，但许多物质必须经染色剂显色。 　　醋酸纤维素薄膜电泳染色后区带可剪下，溶于一定的溶剂中进行光密度测定。也可以浸于折射率为1.474的油中或其他透明液中使之透明，然后直接用光密度计测定。 　　它的缺点是厚度小， HYPERLINK /wiki/k-%D1%F9%C6%B7_n-y.html \t _blank 样品用量很小，不适于制备。 　　原理： 　　醋酸纤维素薄膜电泳（cellulose acetate membrance electrophoresis）以醋酸纤维薄膜为支持物。它是纤维素的醋酸酯，由纤维素的羟基经乙酰化而制成。它溶于丙酮等有机溶液中，即可涂布成均一细密的微孔薄膜，厚度以0.1mm-0.15mm为宜。太厚吸水性差，分离效果不好；太薄则膜片缺少应有的机械强度则易碎。 　　醋酸纤维素薄膜与滤纸相比较，有以下优点 　　（1）醋酸纤维素薄膜对蛋白质样品吸附极少，无拖尾现象，染色后背景能完全脱色，各种蛋白质染色带分离清晰，因而提高了测定的精确性。 　　（2）快速省时。由于醋酸纤维素薄膜亲水性较滤纸小，薄膜中所容纳的缓冲液也较少，电渗作用小，电泳时大部分电流是由样品传导的，所以分离速度快，电泳时间短，一般电泳45-60min即可，加上染色，脱色，整个电泳完成仅需90min左右。 　　（3）灵敏度高，样品用量少。 血清蛋白仅需2μl血清，甚至加样体