第五章 应用(二)煤微生物转化.docVIP

2014年3月14日星期五10时43分27秒 第五章 煤的微生物转化 1 意 义 ★ 我国是世界上最大的产煤国和消费国。中国煤炭工业可持续发展的出路就是实施中国洁净煤战略。 ★ 传统的煤化工企业（煤炭气化和煤炭液化），建设和运行成本高昂，是典型的高能耗、高危险及高污染的“三高”企业。 ★ 煤炭工业必须走 “绿色”煤炭转化之路——煤炭生物降解转化技术，这样既符合我国的国情，又符合洁净煤技术的国际发展方向，是我国能源可持续发展的一条必由之路。 ★ 当前我国已成为石油进口和消费绝对水平的国际第二大国，增量水平上的头号大国。国家战略安全决定了我国能源战略必须立足国内优势煤炭资源走以煤代油、煤炭绿色转化之路。所以本课题研究有着十分重要的意义。 2 定 义 ★ 煤的生物转化（Bioconvertion or Biotransformation）是属煤炭生物加工的范畴，是指煤在微生物参与下发生大分子的解聚作用，称之为生物降解转化或生物溶解（Biodegradation or biosolubilization），主要是利用真菌、细菌和放线菌等微生物的转化作用来实现煤的溶解、液化和气化，使之转化成易于溶水的物质或者烃类气体，从中进一步提取或者转化有特殊价值的化学品以及制取清洁燃料、工业添加剂及植物生长促进剂等。 3 可 行 性 ★ 煤炭生物转化的可行性：煤，石油和木质素三者在大结构组成的同源性以及某些微生物在碳素循环的特殊性决定了煤炭生物转化的可能性。 ★ 煤微生物转化研究于20世纪80年代初。始于德国F.V.Fakoussa博士和美M.S.Cohen教授分别报道了某些真菌能在煤块上生长，将煤溶解转化成黑色水溶液。 4 降 解 菌 种 ★ 煤炭生物降解转化菌种： 研究发现对煤炭具有降解转化功能的菌种有：细菌类有Pseudomonas cepacia strain DLC-07等；放线菌类有Streptomyces setonii 75Vi2等；真菌类的担子菌属中有Phanerochaete chrysosporium等；酵母菌中的一些种及丝状真菌中的Aspergillus sp.等。 在这些种属中，云芝、青霉、假单胞菌的液化能力较强。 5 意 义 ★ 当前，煤炭生物转化国内外大多停留在菌种的筛选和常规诱变上。 ★ 利用基因工程的手段构建能够降解特殊化合物超级工程菌是微生物方向前进。据报道美国就已用4种假单胞细菌的基因组入到同一菌株中，创造了有超常降解能力的超级菌，其降解石油的速度奇快，几小时能够分解石油中三分之二的烃类，而自然需要一年多才行。 ★ 故本课题采用一些具有不同降解原理的菌种进行细胞融合、基因重组方面的研究，力求从根本上改造煤炭的降解转化菌种。 ★ 利用基因工程的手段构建煤炭降解转化高效工程菌是本论文的特色。 6 微生物溶煤试验方式及溶煤反应器 固体表面溶煤 操作方法 把配制好并热溶的固体琼脂培养基分装在表面皿或试管中，灭菌，试管摆斜面。菌种接种于固体面层上。待菌丝长满或快长满整个表面时。把试验用煤样加在菌丝面层上。然后观察、记录现象，收集液体产物等。 7 微生物溶煤试验方式及溶煤反应器 胞外液溶煤 这种方法是用液体深层培养菌种。实验室里一般用摇瓶培养。待菌丝生长一段时间后．用真空过滤等方法收集菌体胞外液（即无细胞滤液），然后加入灭过菌的煤样进行溶煤。 优点：易于收集溶解产物．胞外液中不含菌体细胞．也易于深入考察溶煤过程和探讨溶煤适宜条件。 8 微生物溶煤试验方式及溶煤反应器 细胞液溶煤 煤样直接加入培养液中，菌体、煤样、培养液直接接触。煤样可以在接种时一并加入，或在培养一段时间后再加入。待煤样溶解后再过滤或离心分离液体与固体菌丝体和未溶煤。 优点：易于放大，且操作过程简单，有应用的可行性。 9 溶煤微生物及可被微主物溶解的煤 溶煤微生物 （1）有的是细菌； （2）有的是放线菌； （3）大多数是真菌。 溶煤微生物的来源 根据它们的代谢产物，如分泌的酶、螯合剂等具有攻击煤中或类似于煤的有机化合物中某些成分、结构等作用，而从现有的各种微生物中筛选出来的。 从生长在暴露于自然界中的煤上的微生物中分离菌种。 不同的微生物与不同煤样的作用有一定的匹配关系。因此，不同煤种的溶煤微生物的筛选就显得非常重要。 10 可被微主物溶解的煤 可被微生物溶解的煤的种类 分化煤和未分化的各种褐煤、次烟煤、烟煤等。 煤的微生物溶解程度与煤的氧化程度关系 煤的微生物溶解程度由大到小的顺序为： 1）分化煤； 2）暴露在空气中的煤； 3）未暴露在空气中的煤。 泥炭 而未经处理的泥炭难于被微生物降解。 煤的氧化程度被作为煤种筛选的一个重要因素 11 微主物溶煤活性物及溶