烧伤水疱液对间充质干细胞体外培养及表型转化影响.pdfVIP

烧伤水疱液对问充质T细胞体外培养及表型转化的影响 烧伤水疱液对问充质干细胞体外培养及 表型转化的影响 硕士研究生： 刘立柱 导 师： 荣新洲 广州医学院附属市一人民医院烧伤科 摘 要 如何处理创面的水疱是烧伤临床工作中经常遇到的问题，因为大多烧伤患者 是II度创面，并多伴有水疱存在。解决这一问题可以加速烧伤创面的愈合并减少 因处理不当引起创面加深。近来对人骨髓问充质干细胞(Marrowmesenchymal stem celis，MSC)研究表明，MSC具有自我更新和多向分化潜能，在机体损伤时 它们可以聚集至损伤部位，通过直接分化为同类型细胞或提供适合组织更新的微 环境而促进其修复，损伤环境中可能有促进MSC横行分化的因素。同样MSC在烧伤 创面有定向聚集并部分以表型转化参与创面修复的作用，这种转化可能是在某种 创面环境因素的诱导下完成的。烧伤水疱液中存在许多细胞因子，它在MSC参与 创面修复的过程中是否起到了某种积极的作用尚不得而知。实践中大家公认，引 流水疱液保留水疱皮，可以减轻创面污染，并促进和加速创面愈合，但现在仍然 没有相关研究证实其原因。 本研究目的在观察烧伤水疱液对入骨髓间充质干细胞体外培养的影响，探讨 水疱液能否促进MSC向表皮细胞转化，进而得出水疱液对烧伤创面的影响。最终 指导临床正确地处理烧伤创面水疱液。 研究目的 观察烧伤水疱液对人骨髓间充质干细胞(Msc)体外培养及表型转化的影响， 探讨水疱液对烧伤创面的利弊，进而为烧伤临床正确处理水疱提供理论依据。 烧伤水疱液对『丑J充质T细胞体外培养及表掣转化的影响 实验方法 收集人烧伤后12、24、48小时水疱液。同时体外分离、培养、扩增、鉴 定MSC，用第三代MSC作为实验对象并分组。实验分为对照组和水疱液A、B、 C组．对照组行常规培养：A、B、C组分别加一定伤后12、24、48小时水疱液 培养。观察水疱液微生物生长的情况和MSC细胞牛长情况。培养到第8天时， 再用流式细胞技术检测各组细胞中细胞表面蛋白CD44、细胞角蛋白CK7的阳 性表达率。 实验结果 未发现水疱液微生物生长；各组MSC细胞形态无明显变化，但水疱液组细胞 数量有所减少，并随伤后水疱液时间的延长，细胞数量下降更明显。A、B、C组 与对照组比较，水疱液组CD44指标明显降低，随着伤后水疱液时间加长，CD44 指标降低更显著；与对照组比较，水疱液组CK7指标明显升高，但随伤后水疱液 时间加长，CK7指标升高值有所减弱。 结论 初步研究结果表明：烧伤水疱液对MSC体外培养有明显的抑制牛长作用：同时 兼有一定的促进其表型转化作用。并随着烧伤后水疱液时间加长，抑制牛长作用 更明显，但表型转化作用明显减弱。 关键词：水疱液； 问充质干细胞： 细胞培养； 表型转化 2 烧伤水疱液对问充质T细胞体外培养及表犁转化的影响 OilMSC Theeffectofburnblister andits phenotype - ●- convertculturedinvitro Liu Postgraduate：Lizhu Supervisor：XinzhouRong