应用！#$基因间隔区碱基测序对中药%大黄进行鉴定#.PDFVIP

!! 第四卷 第四期 ! #$%’ ($’ 应用!#$ 基因间隔区碱基测序 对中药 %大黄 进行鉴定# ## 姬可平 李啸红 6甘肃中医学院生物学教研室 兰州 DE9 李应东 甘（肃中医学院中西医结合教研室 兰州 DE ） 张西玲 甘（肃中医学院中药鉴定教研室 兰州 DE ） 摘 要：目的：对大黄种子中提取的)(* 中+,(* 基因内转录间隔区进行:=, 扩增，对于:=, 扩增，并对:=, 扩增产物进行碱基序列测定，以期从分子水平建立对中草药的鉴定标准。方法：常 规提取当归、大黄种子)(* ，利用合成的特异性引物对其)(* 中+,(* 基因内转录间隔区进行套式 :=, 扩增，将扩增产物以四色荧光标记的双脱氧末端终止循环法进行碱基序列测定。结果：经琼脂 糖凝胶电泳证实大黄种子中+,(* 基因内转录间隔区:,= 基因内转录间隔区的完整碱基序列。 ,,(* 基因内转录间隔区的碱基序列可作为分子水平鉴定植物中药材的又一有效途径。 关键词：大黄 套式:,= )(* 测序 +,(* 基因 鉴定 随着分子生物学和基因工程 基因的第 和第 间隔区， 种子，由甘肃礼县科协 +,(* - ! 6)3.03789 技术的日趋成熟，从遗传物质 并对扩增产物进行)(* 碱基排列 何凯农艺师提供，经我院中药鉴定 )(* 分子水平对中药材的鉴定已 顺序的测定，以获得大黄+,(* 基 教研室鉴定。 成为可能。)(* 分子作为遗传信 因别转录间隔区碱基序列作为其 ! 实验仪器及试剂 息的直接载体，不受外界因素和 分子水平的鉴定标记。现将研究 :; !’ :=, 仪 （美国）， 生物体发育阶段及器官组织差异 结果报告如下。 凝胶成像系统 （ 中国计量 )!? 的影响，因而以)(* 分子特征进 科学院华电公司），)@* 电泳仪 一、材料和方法 行物种鉴别准确可靠。本文报告 （上海生化所西巴斯生物技术开发 以植物 基因内转录间隔区通 - 实验材料 公司）， · 台式高速离心机 +,(* AB5 -CB 用引物套叠式扩增中药大黄种子 掌叶大黄,./ 01 23%13401 5 （上海医用分析仪器厂），:=, 测 收稿日期!##$#%$ 甘肃省自然科学基金项目 （ ）。 # FG --*!HHI@ 本文联系作者：姬可平，甘肃中医学院基础课部生物学教研室副教授。主持省级科研课题 项，厅局级课题 项，参加省级课题 项，厅 ## - - E 局级课题 项，获厅局级课题科研三等奖 项。 。 ’ - A/%JKE-IC-KKICD’I 〔 〕 77 !#$ %’()( *)$ +(,)#-. / 0$(1)’2 *3’) 4 +1*$’3’)*# 5,’)(6( 0($’’)(