抗菌抗病毒大黄素型蒽醌类成分提取分离技术探究及应用.doc

抗菌抗病毒大黄素型蒽醌类成分提取分离技术探究及应用（1.南京中医药大学；2.南京中医药大学 江苏省中药炮制重点实验室，江苏 南京 210029）?? 摘 要：经研究发现大黄素型蒽醌类化合物对细菌和病毒有明显的抑制作用。该类化合物的分离和提纯近年来取得了不少进展，发现了一些新技术、新工艺，使得提取、分离更加快速、有效。对国内外抗病毒大黄素型蒽醌类成分提取分离技术及其应用作一概述，并展望其开发应用前景。? 关键词：大黄素型蒽醌衍生物；抗菌；抗病毒；提取分离技术? 中图分类号：R284.2文献标识码：A文章编号：1673-2197（2009）01-0042-04? 大黄素型蒽醌类衍生物通常呈黄色，系由C15至C16组成的由8单位的醋酸-丙二酸形成的多酮棕榈酸经闭环、脱羧生成的一类化合物。常见的有大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素（结构式如图1所示）。其羟基分布于两个苯环上，具有泻下作用[1]。近年来发现的大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素等4种游离大黄素型蒽醌类化合物对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）均有较强的抑制生长作用，而大黄提取物（Rheum officilale extracts）有中等程度的抑制生长作用（见表1）[2]。大黄蒽醌类化合物抗流感病毒的半数有效浓度（IC50）为122.4μg/mL，治疗指数（TI）为1.9，且对流感病毒抑制作用存在明显的量效反应关系[3]。Andersen DO等对多种蒽醌及其衍生物进行抗病毒筛选，结果显示，具有羟基和甲基取代的大黄素型蒽醌衍生物对膜病毒如：疱疹性口炎病毒、单纯疱疹病毒（HSV-1，2）、副流感病毒等均有抑制作用[4]。另有研究表明，芦荟大黄素对带状疱疹病毒、假狂犬病毒、流感病毒有灭活作用。电镜复制检验发现，HSV膜受到部分破坏。因而提示了大黄蒽醌类对膜病毒有直接的杀灭作用。大黄素在光照影响下，对HSV-1显示较强的灭活作用，它的衍生物对人巨噬细胞病毒也有抑制作用[5]。该类成分通常以游离或苷的形式存在于蓼科大黄属（rheum）、酸模属（Rumex）和蓼属（Polygonum），豆科决明属（Cassia）等植物中。有关大黄素型蒽醌类衍生物的分离纯化，除采用常规法外，近年来又出现了一些新技术，使得提取分离更加有效、快速。现就一些常规提取技术与新技术在大黄蒽醌类成分分离上的应用作一综述。 1 常规系统溶剂提取法? 常规溶剂提取法是先用大量加热乙醇反复多次提取，减压浓缩后再用溶剂如苯、乙醚、戊醇、甲基丁酮或氯仿提取大黄中各种游离状态的蒽醌衍生物，残渣再以稀酸（硫酸或盐酸）和溶剂（苯或氯仿）水解提取，不但费时，而且要消耗大量溶剂。改进的常规系统溶剂提取法见图2[6]。? 2 新技术的应用? 2.1 微波提取技术? 微波萃取是利用微波来提高萃取率的一种最新发展起来的新技术。微波加热属内部加热过程，经过微波辐射后能富集药材中有效成分。具有选择性高、操作时间短、溶剂耗量少、有效成分得率高的特点，被应用于中药及天然化合物的生物活性成分提取等方面。 郝守祝等比较了微波提取法与常规提取方法的提取效率，考察了微波输出功率、药材粒径、浸出时间对提取效率的影响，确定微波输出功率为480W，60目大黄粉，微波提取20 min后，其所得游离蒽醌的含量明显高于常规的水煎煮法，与95%乙醇回流提取法相当[7]。沈岚等在研究微波提取时，以大黄中总蒽醌的含量为评价指标，从提取率与提取速度两方面进行了微波萃取与常用提取方法的比较研究，结果表明用微波萃取大黄 5 min的提取率已超过超声提取法 60 min的提取率，15 min已达到或接近索氏提取法2h和水煎法的提取效果[8]。胡秀丽等研究了大黄总蒽醌的微波辅助提取、超声提取和索氏提取方法，并利用分光光度法测定了提取液中总蒽醌的含量。结果表明微波辅助提取法的提取率最高（达1.91%），是超声法的1.13倍，是索氏提取法的1.29倍[9-10]。2.2 超声提取技术? 超声波是一种弹性机械振动波，能破坏植物药材的细胞，使溶媒渗透到药材细胞中，从而加速药材中的有效成分溶解，以提高有效成分的提取率。? 超声技术已经广泛应用于陆地及海洋植物的药用成分的提取[11]，如郭孝武用不同频率的超声波从大黄中提取大黄蒽醌类成分。与常规煎煮法提取相比，超声技术无需加热，且随超声波频率不同而得率不同，尤以频率为20 kHz的超声提取后，大黄蒽醌成分的得率最高[12]。张海晖等采用正交试验设计法，以水为提取溶剂，发现采用超声波强化提取10min，对游离蒽醌的提取率即与水煎煮法煎煮60 min提取效果相当；并且以乙醇为提取溶剂的提取效果明显好于水，几种方法相比较，以乙醇作为提取溶剂的超