反应器结构和表观气速对昆虫细胞在气升式反应器中培养的影响.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，２８（６ｓ）：１３６～１３９ 反应器结构和表观气速对昆虫细胞在气升式 反应器中培养的影响  赵　亮　张佑红 　靖志强　陈　龙 （武汉工程大学　绿色化工过程省部共建教育部重点实验室　武汉　４３００７３） 摘要　细胞的大规模培养是利用昆虫细胞培养生产杆状病毒的一个关键步骤。相对其他昆虫细 胞培养系统来说，气升式反应器是一个较理想的选择。为了寻找适合细胞生长的反应器最优的 结构参数，棉铃虫细胞ＨｚＡｍ１分别在不同几何参数的反应器中生长。下降室和上升室的截面积 比，底部系数，高径比这些几何参数和表观气速都与细胞的生长紧密相关。在一定反应器尺寸下 测定表观气速的影响，寻找一个能够提供足够氧分压而又不会对活细胞造成伤害的表观气速。 并且，在不同尺寸反应器中表观气速与液体流速的关系能够测出来。改变反应器的上升室和下 ５ ５ 降室的截面积比和表观气速，活细胞的浓度可以从４．５×１０提高到７．７×１０ｃｅｌｌｓ／ｍｌ，细胞存活 率从９５．１４％提高到９８．３８％。 关键词　昆虫细胞培养　气升式反应器　下降室和上升室的截面积比　表观气速 中图分类号　Ｑ９６ 　　在昆虫的许多重要科中几乎都有杆状病毒 数都是设计和优化气升式反应器过程需要重要考察对 ［１］ ［６～８］ ［８］ （ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓｅｓ）发生，并导致昆虫得病死亡 。离体大 象 。表观气速和流体动力学直接相关 。表观气 规模培养昆虫细胞是生产生物防治剂—杆状病毒的关 速太小，细胞可能悬浮不起来；表观气速太大，容易造 键步骤。而利用气升式反应器（ＡＬＲ）进行离体大规模 成细胞死亡。因此，寻找一个合适的表观气速液是优 ［２］ 昆虫细胞培养有较大优势 。 化反应器势在必行的。 　　本实验采用的是小型的内循环式气升式反应器， 　　本组在不同的表观气速和Ａ／Ａ 的条件下，利用 ｄ ｒ 它不是依靠传统的机械搅拌，而是利用反应器内不同 气升式反应器进行棉铃虫细胞 ＨｚＡｍ１的培养，并绘制 部位的液体密度差来进行循环，实现氧的传递和物料 细胞生长曲线。 ［３，４］ 的混合，且反应器内流体剪切力分布相对较均匀 。 为达到设计和优化气升式反应器的目的，需要考虑的 １　材料与方法 主要是两个方面的问题：一个是维持气升式反应器内 １．１　材　料 气液固的循环。二是减小反应器体系内各因素对细胞 　　气升式反应器，其工作体积５００ｍｌ，本实验室制图， 的负面影响。 北京玻璃厂制作完成。反应器配套 ｐＨ探头和氧探头 　　利用气升式反应器能够给细胞提供充足的氧气和 购自ＢｒｏａｄｌｅｙＪａｍｅｓ公司。棉铃虫细胞ＨｚＡｍ１，由中国 温和的生长环境。由于反应器的几何构造对其流体动 科学院武汉病毒所提供。培养基为改良的Ｇｒａｃｅ’ｓ培 力学有直接的影响［５］，下降室和上升室的截面积比 ［１０］