流式应用连载之—微粒检测FACSCelesta流式应用连载之.PDFVIP

FACSCelestaFACSCelesta 实实验报告验报告 FACSCelestaFACSCelesta 实实验报告验报告 —————————————————————————————————————————————————————————————— —————————————————————————————————————————————————————————————— FACSCelesta 流式应用连载流式应用连载之—之—微粒检测 流式应用连载流式应用连载之之—— 一．实验概述 ： 流式细胞仪对纳米级微粒的分辨能力是代表仪器的先进程度的指标之一，而 近两年随着各种微囊泡、微颗粒的研究成为热点，流式细胞仪的这一检测能力也 愈发成为科研工作者关注点之一，本实验即以第三方公司的纳米微粒为样本，探 究 FACSCelesta 检测微粒的能力，为后续各微囊泡、微颗粒的检测打下基础！ 二. 实验方法 1. 仪器配置 Flow cytometer Laser Filter FACSCelesta 488nm Blue Laser FSC / SSC(480/10) 2. 试剂耗材 Products Name Catalog No. Size Unit SPHERO™Nano Fluorescent NFPPS-0152-5 0.13um 5ml Particles (Spherotech) 0.22um SPHERO™ Flow Cytometry 0.45um Nano Fluorescent Size NFPPS-52-4K 4X5ml 0.88um Standard Kit (Spherotech) 1.34um BD FACSFlow™ Sheath Fluid 342003 20L 3. 样本制备 1) Control：准备 1 根流式管，加入 1ml Sheath 用以确定本底噪音 2) 单个微球对照管 Single Control ：准备 5 根流式管，分别加入 1ml Sheath ， 各 滴 2 滴小球，5 管分别对应大小为 0.13um/0.22um/0.45um/0.88um/1.34um 的小球 ，摇均后直接上机。 3) 样本管：准备 1 根流式管，加入 1ml sheath，依次加入以上 5 种大小的小球， 混 匀后直接上机 FACSCelestaFACSCelesta 实实验报告验报告 FACSCelestaFACSCelesta 实实验报告验报告 —————————————————————————————————————————————————————————————— —————————————————————————————————————————————————————————————— 4. 上机检测策略 开启 FACSCelesta，打开 Diva 软件，上样检测，收集 100000 events 1) Control 管上样，调节 FSC/SSC 电压，确定 Noise 位置 2) 大小不同的单个微球对照管分别上样，在 FSC/SSC 图上将每种小球设门 3) 样本上样，收集 100000 events 的数据 三. 实验结果: １. Single Control: ２. Sample: 0.13um/0.22um/0.45um/0.88um/1.34um Mix