单基因病的诊断4的.pptVIP

单基因遗传病的诊断;;;一 病史、家族史和体症1. 病史;( 1 ) 家族史; 3 . 生育史;4. 症状和体症;由于大多数遗传病在婴儿和儿童时期即可有体症和症状出现，故除观察外貌特征外，还应该注意身体发育情况：诸如体重增长速度，智力增进、性器官以及第二性症发育、肌肉的张力、婴儿啼哭的声音等情况。 由于有遗传异质性，若欲作出病因诊断，单凭体症、症状资料是非常困难的，一定要进行必要的实验室检查。;二、系谱分析;;一例多指（趾）的系谱;一例β-地中海贫血的系谱;1;一例甲型血友病的系谱;2;进行系谱分析应注意的问题;HbA HbA HbA HbS HbS HbS 正常人 携带着 患者（致死） 无 有（50%） 有（全部） 无 有（生存力强） ----;三、生物化学检查;1. 代谢产物的检出;2. 酶和蛋白质的分析;检测材料的主要来源有： 特定的组织和细胞，如肝细胞、皮肤成纤维细胞，肾，肠粘膜细胞等。 注意的问题：一种酶的缺乏不一定在所有组织中都能够检测出来。例如苯丙氨酸羟化酶必须用肝组织活检，而血细胞中无法得到。;上海：1981～1987年对284,396名新生儿进行PKU筛查，查出PKU患儿15名，高苯丙氨酸血症4名。;四、基因诊断;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;1978年，Kan YW —— 镰状细胞贫血;基因诊断的优点; 基因诊断的难点：对大多数疾病尚未找到合适的基因诊断方法，另外由于遗传异质性、基因突变的多样性，一种基因诊断方法对同一疾病往往有很大差异。 基因诊断的对象：一般是指单基因病和某些有主基因改变的多基因病。 至1997年，发现人类单基因病遗传病已达8587种，现已达到15988种;进行基因诊断必须具备的条件：;基因诊断方法;（一） 聚合酶链反应 (polymerase chain reaction, PCR);PCR的原理： 1. 为可选择性扩增,要有特异引物 2. 要有前身物、聚合酶和离子 3. 是链式反应，每一周期经过变性、复性和延伸三步 4. 一周期后DNA倍增; PCR的过程： 变性（92-95；1分钟） 复性（40-60；1分钟） 延伸（72；1.5分钟） ;; ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;α1 α2;Multi-PCR;PCR-SSCP;PCR-SSCP;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; PCR-DHPLC DHPLC（变性高效液相色谱） 进行基因突变检测的原理 DHPLC进行基因突变检测是基于异源双链的形成和不同的双链与吸附拄的结合牢固程度不同。; 一个杂合子个体，PCR产物一定含有野生型和突变型两种DNA，并且两者的比例为1:1，将PCR产物进行变性复性过程，杂交会形成同源双链和异源双链，同样，当把野生型和突变型PCR产物混合后，进行变性复性过程，杂交后会出现四种情况。; 异源双链由于碱基对不匹配，在部分变性的温度条件下，就会在不匹配的碱基对处部分解链，由于单链DNA带负电荷减少，结合力弱，因此，异源双链比同源双链先洗脱出来，根据柱子保留时间的不同将同源双链和异源双链分离，出现不同的检测峰。; DHPLC的特点： 1）快速分离DNA分子，一般进行基因突变检测，一个样品约需8.8分钟 2）自动化操作系统 3）准确测定DNA片段大小 4）基因突变检出率高，达95-100% 5）经济、操作简便、PCR产物无须进行纯化处理即可用于突变检测 ;（二）分子杂交; Southern印迹杂交 (South