主要荧光素一览表.docVIP

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主要荧光素一览表.doc

(1)荧光素类 Fluorescein   标准荧光素(Reference standard)之一,在其基础上进行结构改造,可产生一系列荧光素衍生物。   Fluorescein适用于Argon-ion Laser的488nm光谱线,有相对高的荧光吸收,较好的荧光产率以及良好的水溶性。标记蛋白时通常不会产生蛋白沉淀。   与其他荧光素类衍生物一样,Fluorescein具有光淬灭率高,pH敏感性强与发射波谱宽的缺点。   主要应用于聚焦激光扫描微阵列(Confocal laser scanning microscopy)和流式细胞计应用(Flow cytometry)。 FITC   异硫氰酸荧光素,Fluorescein isothiocyanate,是荧光素衍生物的一种,5-FITC较6-FITC更经常使用。   FITC的异硫氰酸基能与氨基反应,可用于标记氨基修饰DNA,一旦形成,产物极为稳定。适用于Argon-ion Laser的488nm光谱线,Abs/Em=492/519nm(pH=9.0)。与蛋白的结合力也强。   FITC具有荧光素衍生物的普遍特性。在水中易变坏,不能长久保存。   FITC-Oligo 广泛用于杂交探针;FITC-多肽用于Edman降解蛋白测序;FITC也经常被用于蛋白电泳检测(即使是毛细管电泳)和荧光能量激发转移测试。 FAM   羧基荧光素,Carboxyfluorescein,是荧光素衍生物的一种,5-FAM较6-FAM更经常使用。   Carboxyfluorescein-5-succimidyl ester,即5-FAM(NHS)广泛存在于荧光标记试剂盒。 与FITC相比,FAM与氨基反应更快,产物也更稳定,但FITC结合蛋白的量更大且进程更易于控制。   FAM也适用于Argon-ion Laser的488nm光谱线,Abs/Em=492/518nm(pH=9.0),具有荧光素衍生物的普遍特性,在水中稳定。   5-FAM主要应用于DNA自动测序中,标记其中的d/ddCTP(PE公司),也经常用于PCR产物定量,核酸探针等。 TET   四氯荧光素,Tetrachloro fluorescein,是荧光素衍生物的一种。   TET以及HEX均是在FAM基础上加以改进的,氯原子使FAM的Abs与Em值都产生一定的红移,并在一定程度上减弱了pH敏感性。TET也适用于Argon-ion Laser激发光源,Abs/Em=521/536nm 。   TET,HEX,FAM和TAMRA可配合用于DNA自动测序中,其中TET用于标记d/ddATP,HEX用于标记d/ddGTP或d/ddATP(PE公司)   HEX   六氯荧光素,Hexachloro fluorescein,是荧光素衍生物的一种。   适用于Argon-ion Laser激发光源,Abs/Em=535/556nm。(请参见TET介绍)   JOE   羧基-4,5-二氯-2,7-二甲氧基荧光素,Carboxy-4,5-dichloro-2,7-dimethoxyfluorescein,是荧光素衍生物的一种,6-JOE更被广泛使用。   JOE荧光产量高,pH敏感性弱,适合于标记蛋白。6-JOE也适合于Argon-ion Laser激发光源,Abs/Em=520/548(pH=9.0)   常用于DNA自动测序,标记d/ddATP,也经常被用于进行电泳检测与PCR产物定量。 (2)罗丹明类(Rhodamine dye) R 110   标准荧光素(Reference standard)之一,在其基础上进行结构改造,即可产生一系列罗丹明类衍生物。   与Fluorescein类衍生物相比,罗丹明类荧光素具有更强的光稳定性,更高的荧光产量以及更低的pH敏感性   罗丹明类荧光素极为适合于标记寡核甘酸,但蛋白会引起大多数罗丹明类荧光素的荧光淬灭,故大多数不适宜用于标记蛋白。   R110被用于DNA自动测序。 TAMRA   全称羧基四甲基罗丹明,即Carboxytetramethylrhodamine,是罗丹明类荧光素衍生物,6- TAMRA被广泛使用。   TAMRA是少数几个能用于标记蛋白的,6- TAMRA适用于Argon-ion Laser激发光源,Abs/Em=547/573nm(Ph=8.0),6-TAMRA(NHS)常用于荧光标记试剂盒中。   6- TAMRA主要用于DNA自动测序中。 Texas Red   Texas Red是一个长波长荧光素,与Fluorescein几乎没有波谱重叠,只适合于Ar-Kr Laser的568nm光谱线或He-Ne Laser的594光谱线,比Tetramethylrhoda

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