AMOSPCR在布鲁氏菌种型鉴定中应用的研究.PDFVIP

维普资讯 一 25一 Q 鹂 中国动物检疫2007年第24卷第10期 文章编号 ：1005—944X(2007)10—0025～03 AMOSPCR在布鲁氏菌种型鉴定中应用的研究 杨海荣 关平原 范伟兴 (内蒙古农业大学动物科学与医学学院 内蒙古 自治区呼和浩特 01o018) 摘要 AMOSPCR是近年来在布鲁氏茵上尝试使用的一种布鲁 氏茵检测方法，可作为布鲁氏茵诊断及茵种类型鉴定的PCR方法，可区分 牛种布鲁氏茵1、2．4型。羊种布鲁氏茵、猪种布鲁氏茵、绵羊附睾种布鲁氏茵。本试验用来 自国内的疫苗s2，M5及国际上常用的布鲁氏茵疫苗 S19．104M试验 AMOSPCR 的效果，同时对AMOSPCR扩增条带进行测序 。结果表 明，除国内布鲁氏茵S19检测结果与国外茵株不同外，其余 的几种疫苗株都得到典型的特征性条带。同时测序结果也表明各种属条带无交叉反应，为今后 国内诊断布鲁氏茵病诊断方法研究指出一个方 向。 关键词：AMOSPCR，布鲁氏茵疫苗，s2，M5 Study on identification ofbrucella spp．useingAMOS PCR Yang Hairong)‘Guan Pingyuan) Fan Weixing~) f1．CollegeofnaimialscienceandnaimalMedicine，InnermongoliaAgriculturalUniversity，huhhot010018，China；2．NationalAnimalQuarantine Institute，MinistryofA culture，Qingdao266032，China) Absract：Recently，anew dlagonostictechniquehasdevelopednamedAMOSPCR， theabbreviationofAbortus，Melitnesis，OvisnadSuis-PCR- Thismethodcna diagnosefourbrucellabiotypes．Inthistest，weusethemethodtodiagnosesomevaccinestrainsofbrucellausedinChina,and atthe sametime ， sequence nad na lysisgenesin thetest．The resultsuggestthatitisgood ofrallthevaccine srtainsexceptofrS19 in China- Thesequence ofeach vaccine isspecial，and itcould bea new wayto diagonose brucella Keywords：AMOSPCR ，brucellavaccine，S2，M5 布鲁 氏菌病 (Brucellosis)是一种 性 、生化试验及血清学试验 ，至少需 传统检测方法相比 100％的符合 ．并 呈世界范围流行的人畜共患传染病 ． 要 5天 ．一般为两周．而AMOS—PCR 准确鉴别牛流产野毒株和疫苗株l【l】。 给养殖生产者和国家造成严重的经济 诊断方法能在24小时内对所测布鲁 本试验采用修饰 AMOSPCRv21． 损失。九十年代．美国平均每年用于布 氏菌分型．并能区分疫苗株和野毒 以国内疫苗株 M5．S2为实验对象验 病防治的费用高达 150亿美元 ．拉丁 株．为政府管理部门提供早期 、有效 证其特异性及灵敏度 同时 自制 美洲同期每年损失 600亿美元 Ill 自 的疫病信息9】【 PCRBu r、国内合成引物验证其引 1995年以来．我国人畜布鲁氏菌病疫 布鲁 氏杆菌 IS711插入序列在数 入我国的可能性及意义 情明显回升 ．局部地区甚至出现暴发口、量和位置上都很保守．所有的种在单 1 材料和方法 31；2004上半年我国报告布鲁氏菌病发 染色体上都含有至少一个拷 贝的 1．1 菌株 病 5753例．已接近2003年全年发病 IS711。AMOS—PCR (AbortusMeliten- 布鲁氏菌疫苗标准株 S19、104M