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人乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)酶联免疫分析(ELISA)
人乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)酶联免疫分析 (ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于检测人血清,血浆及相关
液体样本中乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)水平。
实验原理:
本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA )测定标本中人乳头状瘤病毒抗体
IgM(HPV-IgM )。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中乳头状瘤病毒抗体
IgM(HPV-IgM )相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP 标记的抗原结合,
形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催
化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光
度(OD 值),与CUTOFF 值相比较,从而判定标本中人乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM )
的存在与否。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存
说明书 1 份 1 份
封板膜 2 片(48 ) 2 片(96 )
密封袋 1 个 1 个
酶标包被板 1×48 1 ×96 2-8℃保存
阴性对照 0.5m ×1 瓶 0.5m ×1 瓶 2-8 ℃保存
阳性对照 0.5m ×1 瓶 0.5m ×1 瓶 2-8 ℃保存
酶标试剂 3 m ×1 瓶 6 m ×1 瓶 2-8 ℃保存
样品稀释液 3 m ×1 瓶 6 m ×1 瓶 2-8 ℃保存
显色剂A 液 3 m ×1 瓶 6 m ×1 瓶 2-8 ℃保存
显色剂B 液 3 m ×1 瓶 6 m ×1 瓶 2-8 ℃保存
终止液 3m ×1 瓶 6m ×1 瓶 2-8 ℃保存
浓缩洗涤液 (20m ×20 倍)×1 瓶 (20m ×30 倍)×1 瓶 2-8 ℃保存
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心
20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS (PH7.2-7.4 )稀释细胞悬液,细胞
1
浓度达到 100 万/m 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分
钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS ,PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备
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