铌2桑色素荧光探针猝灭法测定核酸.pdfVIP

( ) 第 30 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究简报 第 11 期 　　　　　　　　 　 　 　　　　　　　 　 　　 2002 年 11 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1319～1321 铌桑色素荧光探针猝灭法测定核酸 朱展才 　汪　静　朱红斌 (漳州师范学院化学系 ,漳州 363000) ( ) 摘 　要 　探讨了应用铌桑色素 MR 络合物作为荧光探针测定核酸的方法 ,最大激发峰与发射峰分别位于 μ μ μ 428 nm 与 497 nm ;测定的线性范围分别为 : HS DNA 10～110 gL 、CT DNA 0～30 gL 、SM DNA 5～60 gL 与 Yeast RNA 200～600 mgL ;相应的检出限分别为 3. 8 、1. 7 、0. 96 与 60 μ gL ,对络合物与 DNA 的吸收光谱、荧光偏 振与热变性行为进行了测量 ,结果指出 :Nb MR 络合物嵌入 DNA 的双螺旋结构中。 关键词 　荧光探针 ,桑色素铌络合物 ,核酸 1 　引　　言 天然核酸的荧光量子产率低 ,直接应用核酸的天然荧光发射方法研究其结构与行为以及进行荧光 测定受到限制1 。因此 ,相继开发了依附外来的荧光探针物质测定核酸的方法 ,如 4 ,6二脒2苯基吲 2 3 + 3 3 + 4 3 + 5 6 ,7 ( ) 哚 、Tb 、Eu 、La 和一些二聚不对称花青染料 。我们研究发现 ,桑色素 MR 能与Nb 形 成络合物 ,在 428 nm 波长激发照射时于 497 nm 波长处发射出强荧光。当加入核酸时 ,其荧光强度受到 显著猝灭。尚未见到用Nb MR 作为荧光探针测定 DNA 的报道。通过实验建立了铌 桑色素 Nb MR 络合物作为荧光探针 ,测定核酸的方法。讨论了Nb MR 与 DNA 作用机理。 2 　实验部分 2. 1 　仪器和试剂 ( ) ( ) LS30 型荧光分光光度计 PerkinElmer 公司 ;UV240 型紫外可见分光光度计 日本岛津公司 ; ( ) PHS3B 精密 pH 计 上海雷磁仪器厂 。 ( ) ( ) ( 鲑鱼精子脱氧核糖核酸 SM DNA 、小牛胸腺脱氧核糖核酸 CT DNA 、鲱鱼精子脱氧核糖核酸 FS ) ( ) ( ) DNA 与酵母核糖核酸 Yeast RNA SinoA