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SOOCHOW UNIVERSITY 博 士 学 位 论 文 论 文 题 目 新生期体表炎性刺激诱发成年大鼠内脏痛过 敏的表观调控机制研究 研 究 生 姓 名 朱琍燕 指 导 教 师 姓 名 徐广银 专 业 名 称 医学神经生物学 研 究 方 向 慢性痛的细胞和分子机制 论 文 提 交 日 期 2014 年9 月 新生期体表炎性刺激诱发成年大鼠内脏痛过敏的表观调控机制研究 中文摘要 中文摘要 研究背景： 肠易激综合症 (Irritable Bowel Syndrome, IBS) 是临床常见的功能性胃肠疾病 (Functional Gastrointestinal Disorders, FGIDs) 之一，患者的主要症状表现为肠道运 动功能紊乱和慢性腹痛，疼痛症状随排便过程而加重，但无明显肠道炎症或病理、 生化指标的异常。目前，对于 IBS 的发病机理仍然不清楚，临床治疗手段短缺， 现有的治疗方法和疗效均不佳，因此，对 IBS 腹痛等症状形成与发展的生物学机 制进行研究具有重要意义。 研究目的： ⑴ 阐述新生期体表炎性刺激(Neonatal Somatic Inflammation, NSI) 诱发内脏痛觉 的特性，验证“新生期体表炎性刺激可以增加成年个体慢性内脏痛敏感性” 的研 究假设。 ⑵ 探讨硫化氢(Hydrogen Sulfide, H S) 是否参与新生期体表炎性刺激引起成年大 2 鼠结肠特异性背根节(DRG) 神经元(T -L ) 兴奋性改变以及痛相关分子辣椒 13 2 素受体或野香草受体1(Transient Receptor Potential Vanilloid 1, TRPV1) 的可塑 性变化。 ⑶ 研究表观调控机制参与新生期体表炎性刺激诱发 H S 合酶胱硫醚-β-合成酶 2 (Cystathionine β-synthase, CBS) 基因变化的机制。 ⑷ 初步结合临床标本进行CBS 和TRPV1 的分子生物学检测，以期为临床IBS 诊 断和治疗提供新靶点。 研究方法： ⑴ 在个体发育不同时间点(大鼠出生后10d、3w、6w) ，给予不同强度的炎性刺激 (完全弗氏佐剂 CFA、卡拉胶/角叉菜胶 Carrageenan 和福尔马林 Formalin) ，通 过结直肠扩张(Colorectal Distension, CRD) 实验进行腹壁撤回反射(Abdominal Withdrawal Reflex, AWR) 评分以检测成年大鼠的内脏痛反应。 ⑵ 采用膜片钳方法记录新生期体表炎性刺激对成年SD 大鼠结肠特异性DRG 神经 I 中文摘要 新生期体表炎性刺激诱发成年大鼠内脏痛过敏的表观调控机制研究 元(T -L ) 兴奋性的影响；同时，观察硫化氢是否参与新生期体表炎性刺激诱发 13 2 的神经元兴奋性的改变。 ⑶ 通过Real-time PCR 和Western blotting 方法分别检测新生期体表炎性刺激诱发 的大鼠结肠DRG (T -L ) 以及肠道粘膜